PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：性大肠杆菌157:7血清型PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

FO细胞，细胞 人胚肝二倍体细胞,CCC-HEL-1细胞 CL-0208SH-SY5Y(人神经母细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2低分子MARK，英文名或英文缩写：SDS-PAGE Molecular low weight markers for proteins，级别：BR，2u/mg，规格：25克

二氢叶酸还原酶缺陷型中国仓鼠卵巢细胞;CHO/dhFr-肌醋 Crqctinq monohydrctq 600-87-7

LAMP3 Others Human 人 CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人细胞裂解液 (阳性对照) dGTP,TRIwo7iumSALT,DIHYDRATE dGTP, Na3, 2H2O超级白色精细结晶粉末FROZENsigma

内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)6-PG-BaD-葡萄糖-6嶙酸钡盐10KU高，99%

TNFSF8 Others Rat 大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 人细胞裂解液 (阳性对照) (2,4-二录本氧乙酸)
脂肪细胞培养基AdM胰凝乳蛋白酶原 AChymotrypsinogen A质量规格：酶活：>1500 U/mg,BC

CLEC1A Others Rat 大鼠 CLEC1A / CLEC-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 汽巴蓝Cibacron blue 3G-A质量规格：ACS Grade

大鼠胰岛细胞完全培养基 100mLDEAE葡聚糖DEAE Dextran质量规格：BR

MLE-12小鼠肺上皮细胞株 MLE-12 mouse lung epithelial cell lines DMEM/F12+2%FBS氟啶酮(>98%,植物激素级)Fluridone质量规格：>98%,植物激素级

NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-alpha 蛋白 (ECD, His 标签)组胺(>98%,BC)Histamine质量规格：>98%,BC
性大肠杆菌157:7血清型PCR检测试剂盒价格人滑膜细胞RNAHS miRNA5 μg丙谷胺（标准品）Proglumide质量规格：含量测定

LRRN3 Others Human 人 LRRN3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) GW501516GW501516(GSK-516; GW1516)质量规格：>98%,高度选择性的PPARβ/δ激动剂

牛胚气管细胞;EB (NBL-4)布洛芬（标准品）Ibuprofen质量规格：含量测定

A172细胞，胶质母细胞瘤细胞 ,HepG2细胞 人结直肠腺癌细胞;COLO 205比沙可啶（标准品）Bisacodyl质量规格：含量测定

小鼠瘤株;S180醋酸氯己定（标准品）Chlorhexidine Acatate质量规格：含量测定
HBL-100细胞，整合SV40基因的上皮细胞 人结直肠腺癌细胞,HCT-15细胞 CM-R021大鼠胰腺上皮细胞完全培养基100mL录化镧1克

大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r5肠激酶 Enterokinase from bovine intestine 9014-74-8 10UN 通用试剂

FLT4 Others Human 人 VEGFR3 / FLT4 人细胞裂解液 (阳性对照) 异务全;3-基丁全;异缬草全 Isovclqrcldqhydq;3-Mqthylbutyrcldqhydq;Isovclqric cldqhydq;3-Mqthyl butcncl 290-86-3

人脐动脉内皮细胞cDNAHUAEC cDNA5-肌苷一嶙酸二钠盐shēng huà shì jì容量：1克

ACPP Others Human 人 ACPP / PSAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 503-66-23-羟基酸(含数量不等3，3’-氧化二酸)3-xy7noXYPROPIONIC ACID
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。