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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3626 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
【产品名称】: 阪崎肠杆菌PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Enterobacter sakazakiPCR
【货号】: BKP3626
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存,避免反复冻融,有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
u 存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(最多冻融3次);
u 运输:采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂,如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒,也可选择其他合适的核酸提取产品。
组成及试剂配制:
酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
阪崎肠杆菌PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。
SIRPA Others Human 人 SIRPA / CD172A 人细胞裂解液 (阳性对照) CRESOLRED,wo7iumSALT红钠盐分析级棕色结晶粉末RTsigma
Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)反式油酸 Methyl elaidate,≥99.0% 1937-62-8 1ML 通用试剂
GPR114 Others Human 人 GPR114 人细胞裂解液 (阳性对照) N-(2-羌基)-N'-(2-磺醋)内盐 HqPqS 7277-39-3
大鼠破骨细胞完全培养基 100mLOCBA邻录50毫升AR,98.5%
AZ-521人细胞 Human gasic cancer cells AZ-521 MEM+10% FBS6211-24-1二本胺磺酸钡DIpxenYLAMINE-4-SULFONIC ACID BARIUM SALT
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2盐酸普拉格雷Prasugrel Hydrochloride质量规格:美国进口
中国仓鼠肺细胞;R 1610 [R1610] 口腔表皮样癌细胞,KB细胞 CIK细胞,草鱼细胞4-羟基可乐定-d44-Hydroxy Clonidine-d4质量规格:美国进口
人胚胎眼巩膜成纤维细胞;HFSF4-羟基可乐定4-Hydroxy Clonidine质量规格:美国进口
HA Others H13N8 甲型 H13N8 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-去亚硫酰-5-硫基头孢哌酮5-Desthiolyl-5-thioxo Cefoperazone质量规格:美国进口
原代神经胶质细胞特制基础无血清培养基Many types of cells包装:500/100mlFmoc-N-苄基甘氨酸Fmoc-N-benzylglycine质量规格:美国进口
阪崎肠杆菌PCR检测试剂盒说明书NCI-H460 人大细胞细胞N,O-双(三甲硅基)乙酰胺(>75.0%(GC))N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide质量规格:>75.0%(GC)
COS-7L, 非洲绿猴肾成纤维细胞巴氯芬(标准品)Baclofen质量规格:HPLC>98%,标准品
人脐带血单个核细胞巴洛沙星(标准品)Balofloxacin Dihydrate质量规格:> 98%,水合物标准品
人胚肾细胞;2V6.11 人胰腺上皮细胞完全培养基 100mL巴洛沙星Balofloxacin Dihydrate质量规格:度> 98.5%,BR,二水合物
人肝细胞;HL-7702[L-02]盐酸苯达莫司汀Bendamustine HCl质量规格:度> 98%
狗肾恶性症细胞;DH82 胚胎成纤维细胞,3T3-Swiss albino细胞 L6细胞,大鼠骨骼肌成肌细胞4-羟基氨苯蝶啶硫酸钠盐质量规格:美国进口4-Hydroxy Triamterene Sulfate, Salt
人脐内皮细胞(人细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]2,4-二氨基-6-苯基-7-蝶啶质量规格:美国进口2,4-Diamino-6-phenyl-7-pteridinol
HA Others H4N6 甲型 H4N6 (A/mallard/Ohio/657/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 外消旋拉呋替丁质量规格:美国进口rac Lafutidine
人羊膜间充质基质细胞HAMSC罗沙替丁质量规格:美国进口Roxatidine
MME Others Cynomolgus 食蟹猴 CD10 / Neprilysin / MME 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-氯-4'-羟基二苯(>95.0%(GC))质量规格:>95.0%(GC)4-Chloro-4'-hydroxydiphenyl Ether
PCR检测试剂盒:
阪崎肠杆菌PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中,按100g:3ml的比例加入Trizol试剂,严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg组织,宁多勿少)置于玻璃匀浆器中匀浆后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol,振荡15s,室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol,振摇,置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min,EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清,纸巾吸干,加入75%乙醇1ml,振摇,充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇,空气干燥10min(可离心加快干燥,尽量吸尽离心液体)。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混匀),-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度,所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳,显示出清晰的28s和18s两条rRNA。