技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：耐久肠球菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
Lec1(仓鼠卵巢细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 B7-H3 / CD276 人细胞裂解液 (阳性对照) 纤连蛋白(人血)，英文名或英文缩写：CIG，级别：超，98%，规格：500克

海马神经元细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)巴豆醋;β-基炳1醋;亚基醋;2-醋(反式);1-羧基炳1;α-醋 Crotoni ccid;α-Crotoni ccid;β-Mqthylccrylic ccid;Solid crotoni ccid;1-Ccrboxypropylqnq;α-Butqnic ccid 107-93-7

PTN Others Mouse 小鼠 Pleioophin / PTN / HB-GAM 人细胞裂解液 (阳性对照) MOLYBDICACIDwo7iumSALTDIHYDRATE钼酸钠二水ACS级白色至微黄色结晶粉末RTsigma

大鼠内皮细胞完全培养基 100mL木糖，英文名或英文缩写：D-Xylose，级别：超，97%，规格：5毫克

RBL-2H3大鼠嗜碱性细胞细胞 RBL-2H3 rat neuophils alkaline cell leukemia MEM培养基(GIBCO)+15%热灭活FBS(录靛酚钠)
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)乙二醇双[4-(乙氧羰基)苯基](>98.0%(GC))Ethylene Glycol Bis[4-(ethoxycarbonyl)phenyl] Ether质量规格：>98.0%(GC)

FRhK-4细胞，恒河猴胚肾细胞 人胚胎胰腺组织来源细胞,CCC-HPE-2细胞 CM-M064小鼠上皮细胞完全培养基100mL乙二醇双(4-羧苯基)(>95.0%(T))Ethylene Glycol Bis(4-carboxyphenyl) Ether质量规格：>95.0%(T)

大鼠癌细胞;MADB1069,9-双[4-(2-羟乙氧基)苯基]芴(>98.0%(GC))9,9-Bis[4-(2-hydroxyethoxy)phenyl]fluorene质量规格：>98.0%(GC)

IL1RAP Others Human 人 IL1R3 人细胞裂解液 (阳性对照) pre-ELM-11(>98.0%(T))pre-ELM-11质量规格：>98.0%(T)

脂肪细胞生长添加物PAGS苯均四酸(>98.0%(T))Pyromellitic Acid质量规格：>98.0%(T)
耐久肠球菌PCR检测试剂盒直销CM-R002大鼠肺平滑肌细胞完全培养基100mL丙磺舒（标准品）Probenecid质量规格：>98%,标准品

NCI-N87细胞，人胃腺癌细胞 人跟细胞,Hp2/o细胞 草鱼肾细胞;GIK诺氟沙星Norfloxacin质量规格：>99,USP,BR,可用于细胞培养

DH82(犬巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2诺氟沙星（标准品）Norfloxacin质量规格：HPLC>98%,标准品

CA9 Others Human 人 CAIX / CA9 人细胞裂解液 (阳性对照) 诺氟沙星盐酸盐Norfloxacin HCl质量规格：含量大于98.5%

人滑膜细胞总RNAHS NA诺氟沙星盐酸盐（标准品）Norfloxacin HCl质量规格：HPLC>98%,标准品
A9细胞，皮下结缔组织细胞 人肝星形细胞正常,LX-2细胞 CL-0088H4-IIE(大鼠细胞 )5×106cells/瓶×25-尿苷质量规格：>99%,BR5-Iodo-Uridine

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-215--2'-脱氧尿苷(苷)质量规格：>98%,BR5-Iodo-deoxyuridine

FCN1 Others Human 人 Ficolin-1 / Ficolin-A / FCN1 人细胞裂解液 (阳性对照) 5--2'-脱氧胞苷质量规格：>98%,BR5-Iodo-deoxycytidine

神经元细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)2'-甲氧基尿苷质量规格：>98%,BR2’-OMe Uridine

NA Others H3N2 甲型 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 神经氨酸酶 (Neuraminidase / NA) 人细胞裂解液 (阳性对照) TES. Na;2-[(三(羟甲基)甲基)氨基]-1-乙磺酸钠质量规格：>99%,ARTES