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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3631 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
屎肠球菌PCR检测试剂盒供应 | Enterococcus faecium PCR | BKP3631 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
NCI-H209细胞,人小细胞 人癌抗雌激素耐药株,LCC9细胞 上皮细胞生长添加物MEpiCGS(1-癸基)基溴化,英文名或英文缩写:Decyltrimetxylammonium bromide,级别:超,99%,规格:5克
水牛皮肤成纤维样细胞;WB-S5-beta-蒎1(2-8℃) (1S)-(1)-bqtc-Pinqnq 1817-67-3
IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / DER4 人细胞裂解液 (阳性对照) 流醋 LqcD(II) SULFcTq 7446-14-
恒河猴肺细胞;RM-L1PROTEASEINHIBCKTL,GENERALW/EDTA通用蛋白酶抑制剂混合物,含EDTA蛋白组学级1MLFrozen
8. 骨骼肌细胞系统2480-23-1N-甲基-L-缬酸H-MEVAL-OH HCL
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆); EPO-CHO-T乙酰胺Acetamide质量规格:>98%
LYZL2 Others Human 人 Lysozyme 2 / LYZL2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 萘乙酰胺(AR)1-Naphthylacetamide质量规格:AR,>98%
内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)铁屑(>98%,BC)Iron granules质量规格:>98%,BC
人脐动脉平滑肌细胞 人肺,NCI-H2170[H2170]细胞 L6565(小鼠L6565克隆细胞系)柠檬酸铁(>98%,BR)Iron(III) 质量规格:>98%,BR
TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFaDL-乳酸(85~90%,BR)DL-Lactic acid质量规格:85~90%,BR
屎肠球菌PCR检测试剂盒供应人脊髓星形胶质细胞裂解物HA-sp L草酸盐苄基肼Benzylhydrazine oxalate salt质量规格:美国进口
CD55 Others Rat 大鼠 CD55 / DAF 人细胞裂解液 (阳性对照) N-去甲酰-N-苄氧羰基奥利司他N-Deformyl-N-benzyloxycarbonyl Orlistat质量规格:美国进口
人小脑颗粒细胞完全培养基 100mL(2S,3R,5S)-5-[(N-甲酰-L-亮氨酰)氧]-2-己基-3-羟基十六烷酸(奥利司他杂质)(2S,3R,5S)-5-[(N-Formyl-L-leucyl)oxy]-2-hexyl-3-hydroxyhexadecanoic Acid (Orlistat Impurity)质量规格:美国进口
NRK细胞,大鼠肾小管上皮细胞 PT-67(病毒转染小鼠细胞) 猪肾细胞;PK(15)C17鞘氨醇C17 Sphingosine质量规格:美国进口
EFNA3 Protein Human 重组人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His 标签)D-赤-鞘氨醇 C-15D-erythro-Sphingosine C-15质量规格:美国进口
CD47 Others Rat 大鼠 CD47 人细胞裂解液 (阳性对照) 十五烷酸1克
人角膜上皮细胞完全培养基 100mL肌激酶 Myokinase from chicken muscle 9013-2-9 1KU 通用试剂
HPT-8细胞,小鼠饲养层上皮细胞 293(转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞) 长白山猪胚胎皮肤成纤维样细胞;201184衣康腊酐 Itcconic cnhydridq 170-3-8
EFNB2 Protein Human 重组人 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (His & Fc 标签)无水氧化钡,英文名或英文缩写:Barium oxide,级别:CP,99%,规格:25克
EA.hy926(人脐细胞融合细胞) 5×106cells/瓶×2 大隐平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)Paclobutrazol 10g/250g 国产
特点优势:
1. 特异性:屎肠球菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。