技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：产肠毒素性大肠杆菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
SUNE-1亚株13-9B细胞，人细胞系 小鼠胚胎成纤维细胞,BALB/3T3 clone A31细胞 CM-H063人肾皮层上皮细胞完全培养基100mLPOPSO,FREEACIDPOPSO生物技术级白色粉末RTsigma

OP9(小鼠骨髓基质细胞) 5×106cells/瓶×2双琥珀酰亚安忻二醋酯磺醋内盐 ≥95% (H-NMR)(-20°C) BS3 8436-77-9

Promocell C-27020 Osteoblast MineralizationMedium, 成骨细胞矿化培养基(即用型) 500ml5,5'-二硫双-(2-硝... 5,5'-Dithiobis(2-nitrobenzoic acid), ... 69-78-3 1G 染色剂

肝实质细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)氧合血红蛋白，英文名或英文缩写：Oxyhemoglobin，级别：BR，98%，规格：1克

PRKD2 Others Human 人 PRKD2 / PKD2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) (亚油酸)
长尾绿猴肾细胞;4647氧化镧(>99%,EP)Lanthanum(III) oxide质量规格：>99%,EP

TEK Others Human 人 Tie2 / CD202b / TEK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 氯化镁六水(分子生物学)Magnesium chloride, hexahydrate质量规格：>99%,分子生物学级

CL-0217SP2/0(小鼠细胞)5×106cells/瓶×2醋酸锰四水Manganese (II) acetate, tetrahydrate质量规格：>98%,BC

LX-2, 人肝星形细胞株 小鼠细胞(分泌促生长激素分泌激素)，GT1.1细胞 OK(负鼠(opossum)肾细胞)神经氨酸酶(≥10 units/ mg )Neuraminidase from Clostridium perfringens质量规格：≥10 units/ mg

人肾透明细胞腺癌细胞;786-O [786-0]乙酸镍四水(>98%,BC)Nickel (II) acetate, tetrahydrate质量规格：>98%,BC
产肠毒素性大肠杆菌PCR检测试剂盒直销人细胞;HOS苯扎氯铵（标准品）Alkyldimethylbenzylammonium chloride质量规格：供HPLC法检查用和容量法含量测定用

人成纤维细胞(HMF)(5×105)苯扎氯铵（标准品）Alkyldimethylbenzylammonium chloride质量规格：含量测定用

CM-H112人脂肪细胞完全培养基100mL甲硫酸新斯的明(标准品)Neostigmine methyl sulfate质量规格：HPLC>99%,标准品

小鼠浆细胞瘤;MPC-11 小鼠直肠平滑肌细胞完全培养基 100mL甘草酸二钾（标准品）Dipotassium glycyrrhizinate质量规格：含量测定

rEPC，大鼠内皮祖细胞-骨髓 Rattus尼美舒利（标准品）Nimesulide质量规格：含量测定
293T细胞，人胚肾T细胞 人细胞,HO-8910细胞 人心肌细胞裂解物HCML戈米辛D(标准品)质量规格：＞98.0% (LC&T)，标准品Gomisin D

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-11-甲基质量规格：>98%1-Methyl Xanthine

IFNA5 Others Human 人 IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-羧基-X-罗丹明质量规格：>95%6-Carboxy-X- rhodamine; 6-ROX

豚鼠皮肤细胞;GP-S2西仑吉肽质量规格：>97%,integrin抑制剂Cilengitide,EMD121974,NSC 707544

IFNA14 Others Mouse 小鼠 IFNA14 / Ierferon alpha-14 人细胞裂解液 (阳性对照) 柴胡皂苷B2（标准品）质量规格：HPLC≥98%，标准品Saikosaponin B2