PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：马病毒4型PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

CD274 Others Mouse 小鼠 B7-H1 / CD274 / PD-L1 人细胞裂解液 (阳性对照) YEASTEXTRACT,BACTERIOLOGICAL酵母粉细菌学级500GRT

Sars结构蛋白表达株;293 001B录铱醋铵 cmmonium hqxcchloroiridctq(IV) 16940-9-4

BTLA Others Mouse 小鼠 BTLA 人细胞裂解液 (阳性对照) HMDS10克AR，99.8%

人脐带间质干细胞 Human umbilical cord mesenchymal stem cells3-吲哚乙酸25克

3T3D细胞，人细胞 嗜热脂肪地芽孢杆菌 SV40T转化的人胚肾细胞;293TBilesalt 25g/1kg 国产
原代肝实质细胞特制基础培养基Many types of cells包装：500/250/100ml外消旋西替利嗪N氧化物（非对映）rac Cetirizine N-Oxide(Mixture of Diastereomers)质量规格：美国进口

A3细胞，人T细胞细胞 转PYTL基因小鼠支持细胞,15P-1细胞 少突胶质细胞生长添加物OGS(3R,5S)氟伐他汀钠盐(3S,5R) Fluvastatin  Salt质量规格：美国进口

NCI-H2087(人非小细胞) 5×106cells/瓶×2(3R,5S)-氟伐他汀钠盐(3R,5S)-Fluvastatin  Salt质量规格：美国进口

BRL-3A(大鼠正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M038小鼠肝内胆管上皮细胞完全培养基100mL 人耐VP16绒癌细胞株;JEG-3/VP16氟伐他汀Fluvastatin质量规格：美国进口

兔主动脉平滑肌细胞;SMC克林沙星盐酸盐Clinafloxacin Hydrochloride质量规格：美国进口
马病毒4型PCR检测试剂盒价格大鼠大隐平滑肌细胞完全培养基 100mL鸟嘌呤 Guanine 质量规格：>99%,BR

GP-293人胚肾细胞 Human embryonic kidney cell line GP-293 DMEM+10% FBS鸟嘌呤 (标准品)Guanine 质量规格：HPLC>98%,标准品

IFNA13 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (His 标签)6-硫鸟嘌呤6-TG/Thioguanine质量规格：>98%,USP,BR

HOS(人细胞) 5×106cells/瓶×2 非01群霍乱弧菌6-硫鸟嘌呤(标准品)6-TG/Thioguanine质量规格：HPLC>98%,标准品

成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)维A酸;全反式维A酸;维生素A酸;视黄酸All-Trans-Retinoic Acid\Tretinoin质量规格：>98%%,USP,BR
人癌细胞;MDA-MB-231亚碲酸钾100克

TNFRSF19 Others Human 人 TNFRSF19 / OY 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,4,5,6-四录邻本二晴 Chlorothclonil 1897-42-6

狗脂肪间质干细胞 The dog adipose mesenchymal stem cells盐酸胍 (常规) Guanidine hydrochloride (≥99.0%) 1950-1-1 100G 通用试剂

HOPC-os细胞，人少突胶质前体细胞 构巢曲霉 人胚肾细胞;293 [HEK-293]HRP标记羊抗人纤维蛋白2000只/箱RT

SW 1353(人细胞) 5×106cells/瓶×2(D-山梨醇)
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。