![]() |
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3681 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
大片吸虫通用PCR检测试剂盒直销 | Fasciola spp.PCR | BKP3681 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
CM-R067大鼠肾足突细胞完全培养基100mL2-(5-溴-2-偶氮)-5-(二乙基)本酚100毫克保存:-20℃
EC109,人细胞CBZ-D-缬酸 CBZ-D-Valine,99% 1685-33-2 5G 通用试剂
EB病毒转化的人B细胞;KMY0926 人脑动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL录加醋异炳酯(约30%的本,约2mol/L)(+4℃) Isopropyl xlonofonmctq 108-3-6
大鼠肺泡巨噬细胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]动力-吲哚-尿素培养基基础shēng huà shì jì容量:25克
IL23R Others Rat 大鼠 IL23R / IL23 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 79803-73-93-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸钠 (MOPSO-Na)MOPSO wo7ium salt
小鼠肾小管上皮细胞MREpiC透明质酸,玻尿酸(分子量80万-150万)Hyaluronic Acid 质量规格:>95%,BR,M.W:80万-150万
NXPH1 Others Rat 大鼠 NXPH1 / Neurexophilin-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 透明质酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量3K)Hyaluronic Acid 质量规格:>95%,BR,M.W:3000
HEF 人食道组织来源细胞透明质酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量10K)Hyaluronic Acid 质量规格:>95%,BR,M.W:10000
CM-R091大鼠成骨细胞完全培养基100mL透明质酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量90K)Hyaluronic Acid 质量规格:>95%,BR,M.W:90000
Caco-2,人结直肠腺癌细胞透明质酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量4K)Hyaluronic Acid 质量规格:>95%,BR,M.W:4000
大片吸虫通用PCR检测试剂盒直销人T细胞细胞;HuT 78洛沙坦Losartan Carboxaldehyde质量规格:美国进口
人卵巢成纤维细胞(HOF) ( 5×105 )N,O-双(叔丁基二甲硅基)乙酰胺(>95.0%(GC))N,O-Bis(tert-butyldimethylsilyl)acetamide 质量规格:>95.0%(GC)
CM-R048大鼠肠巨噬细胞完全培养基100mL1-(二甲基异丙基硅基)咪唑(>98.0%(T))1-(Dimethylisopropylsilyl)imidazole质量规格:>98.0%(T)
小鼠色素瘤细胞;B16 小鼠肝实质细胞完全培养基 100mL1,3-双(氯甲基)四甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))1,3-Bis(chloromethyl)tetramethyldisilazane质量规格:>95.0%(GC)
MA, 小鼠星形胶质细胞 Mouse1,3-二苯基四甲基二硅氮烷(>95.0%(GC))Tetramethyl-1,3-diphenyldisilazane质量规格:>95.0%(GC)
EFNB2 Protein Canine 重组狗 Ephrin-B2 / EFNB2 蛋白 (Fc 标签)2-氨基-4'-氯二苯甲酮质量规格:大于98%,化学2-amino-4'-chlorobenzophenone
U-87 MG(人神经细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠树突状细胞细胞;DCS原百部碱(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Protostemonine
人小气道上皮细胞裂解物HSAEpiCL雪上一枝蒿甲素质量规格:标准品,用于含量测定Bullatine A
CTF1 Others Human 人 Cardioophin-1 / CTF1 人细胞裂解液 (阳性对照) 麦冬皂苷D' 质量规格:HPLC≥98%,标准品ophiopogonin D'
小鼠血细胞;WEHI-3 [WEHI3]2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)紫杉醇质量规格:美国进口2'-O-(tert-Butyldimethylsilyl)paclitaxel
特点优势:
1. 特异性:大片吸虫通用PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。