技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：红斑丝菌PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
NCI-H460细胞，人大细胞细胞 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(低分化),PC-12细胞 CM-R007大鼠上皮细胞完全培养基100mLHISTOCHOICEMOUNTINGMEDIA封组织学级120MLRT

PIEC(猪髋动脉内皮细胞 ) 5×106cells/瓶×2(S)-(-)- 2-录炳醋 (S)-(-)-2-Chloropropionic ccid 9617-66-1

Promocell C-28025 Endothelial Progenitor Medium, 内皮祖细胞培养基(即用型) 100mlL-色安醋;L-2-安基-3-吲哚基-1-炳醋;L-安基吲哚炳醋 L-Tryptophcn;L-β-3-Indolyl clcninq;(S)-2-cMino-3-(3-indolyl)propionic ccid;(S)-(-)-Tryptophcn;Trp 73--3

大鼠雪旺细胞;RSC96N,N-二甲基乙酰胺5毫克2～8℃

CCNE1 Others Human 人 CCNE1 / Cyclin-E1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 6575-24-22,6-二录2,6-Dichloro
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21亚油酸胆酯(>95.0%(T))Cholesterol Linoleate质量规格：>95.0%(T)

ACVR2B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR2B / ACIIB 人细胞裂解液 (阳性对照) 棕榈酸胆酯(>97.0%(T))Cholesterol Palmitate质量规格：>97.0%(T)

骨骼肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)正辛酸胆酯(>95.0%(GC))Cholesterol n-Octanoate质量规格：>95.0%(GC)

HelaS3细胞，细胞 人细胞,SK-OV-3细胞 人真皮成纤维细胞-新生儿cDNAHDF-n cDNA油酸胆酯(>85.0%(GC))Cholesterol Oleate质量规格：>85.0%(GC)

非洲绿猴肾细胞;VERO C1008 (E6)氯化胆(来自牛脂)(>87.0%(GC))Cholesteryl Chloride from Beef Fat质量规格：>87.0%(GC)
红斑丝菌PCR检测试剂盒说明书人恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]木聚糖酶Xylanase from Trichoderma viride 质量规格：BR,6万U/G

TEK Others Mouse 小鼠 Tie2 / TEK (aa 770-1122) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) β-Apo-土霉素β-Apo-oxytetracycline质量规格：美国进口

CL-0315A3(人T细胞细胞)5×106cells/瓶×2α-Apo-土霉素α-Apo-oxytetracycline质量规格：美国进口

HET-1A, 人食管上皮细胞 人肾上腺皮质瘤，SW13细胞 Ca Ski(人小肠颈部表皮样癌细胞)二水合土霉素Oxytetracycline Dihydrate质量规格：美国进口

人细胞;MGC-8034-差向土霉素4-Epioxytetracycline质量规格：美国进口
LM3细胞，人高转移细胞 小鼠细胞,M1细胞 犬肾细胞;MDCK(NBL-2)对甲氧基肉桂酸质量规格：AR,99%p-Methoxycinnamic acid

LTEP-a-2(人) 5×106cells/瓶×25-羟基色胺盐酸盐,血清胺盐酸盐质量规格：>97%,BRSerotonin hydrochloride(5-HT)

Promocell C-21160 Airway Epithelial Cell GrowthMedium KIT,上皮细胞生长培养基套装 500ml巨大戟醇(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品Ingenol

人成纤维细胞HBFβ-香树素(标准品)质量规格：HPLC≥95%,标准品β-Amyrin

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/Texas/05/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) ADA单钠盐质量规格：>99%ADA mono salt