大肠杆菌通用PCR检测试剂盒说明书【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

【产品名称】: 大肠杆菌通用PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Escherichia coliPCR
【货号】: BKP3670
组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

大肠杆菌通用PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

QBC-939, 人细胞 (瘤株),Ke-3细胞 HL-60(急性粒细胞细胞)Estradiolβ-雌二醇100克CP，99%

小鼠细胞;Sp2/0-Ag1417-羟基 sprengerin... Hydroxy Sprengerinin C, 17 (HPLC,≥98%) 1029017-75-1 10MG 标准品

FLT3 Others Human 人 FLT3 / FLK2 / CD135 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-拂-2’-脱氧脲核苷 Floxuridinq 20-91-9

大鼠肾小球系膜细胞;HBZY-1宝石红蛋白染色试剂，英文名或英文缩写：SYPRO red protein stain，级别：高，95%，规格：500克

人成纤维细胞( HCF) ( 5×105 )9032-75-1果胶酶(+4℃)Pectinase
微内皮细胞cDNAHCMEC cDNA溴化胆,从牛脂来(>98.0%(T))Cholesteryl Bromide from Beef Fat质量规格：>98.0%(T)

SLPI Others Human 人 SLPI 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 胆壬酸酯(>89.0%(GC))Cholesterol Pelargonate质量规格：>89.0%(GC)

大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6胆壬基碳酸酯Cholesterol Nonyl Carbonate质量规格：

95-D细胞，高转移细胞 人细胞,M2e细胞 正常大鼠肾细胞;NRK胆庚基碳酸酯Cholesterol Heptyl Carbonate质量规格：

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2胆油醇碳酸酯(>70.0%(HPLC))Cholesterol Oleyl Carbonate质量规格：>70.0%(HPLC)
人导管瘤细胞;BT-4742,2'-二羟基偶氮苯(>98.0%(T))2,2'-Dihydroxyazobenzene质量规格：>98.0%(T)

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) S-乙酰半胱氨酸盐酸S-Acetamidomethyl-L-cysteine hydrochloride质量规格：>98%,BR

CM-R022大鼠甲状腺上皮细胞完全培养基100mLO-叔丁基-L-苏氨酸甲酯盐酸盐O-tert-Butyl-L-threonine methyl ester hydrochloride质量规格：0.98

Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞细胞 牛肾细胞,MDBK细胞 Hs 578Bst(人成纤维细胞)L-丙氨酸异丙酯盐酸盐L-Alanine isopropyl ester hydrochloride质量规格：>98%

小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1L-天冬酰胺甲酯盐酸盐Methyl L-asparaginate monohydrochloride质量规格：0.98
大肠杆菌通用PCR检测试剂盒说明书人癌细胞;MDA-MB-468Flurprimidol2-甲基-1-嘧啶-5-基-1-(4-三扶甲氧基本基)丙-1-醇1KU高，98%

TF Others Human 人 ansferrin / TF 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴-3-基-2- 3,3-Dimqthylcllyl bromidq 870-63-3

牛脑垂体提取物BPEEDACoHC11-乙基-(3-二甲基基丙基)碳二亚胺盐酸盐100毫克高，99%

GAP43 Others Human 人 GAP43 / Neuromodulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 羟基乙酸shēng huà shì jì容量：100毫克

CHL-Don 中国仓鼠肺成纤维样细胞(-N，N-双

PCR检测试剂盒

 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。