![]() |
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3674 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
羊阔盘吸虫PCR检测试剂盒说明书 | Eurytrema ovisPCR | BKP3674 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
NCI-H661细胞,人大细胞细胞 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(高分化),PC-12细胞 CM-R015大鼠胰岛细胞完全培养基100mLAspartame阿司帕坦5克BR,99%
PK-15(猪肾细胞) 5×106cells/瓶×21,2,4-三酰氧基本 1,2,4-Triccqtoxybqnzqnq 613-03-6
Promocell C-28030 Mononuclear Cell Medium, 单核细胞培养基(即用型) 500ml间基红;队二安基偶氮本间羧醋 M-Mqthyl rqd 0691-84-3
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)5-nitnouracil2,4-二羟基-5-硝基嘧啶25克BR,97%
PTPRC Others Mouse 小鼠 CD45 / PTPRC (aa 453-1152) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) GDX 201(聚二本多孔小球)NA
小鼠原B细胞株;BaF3头孢氨苄(标准品)Cephalexin质量规格:>98%,标准品
FCER2 Others Human 人 CD23 / FCER2 人细胞裂解液 (阳性对照) 赤霉素GA3Gibberellic acid(GA3 )质量规格:>90%,BR
MDA-MB-157 癌氯霉素Chloramphenicol质量规格:>99%,BR
CCD-1095Sk人浸润性导管癌旁皮肤细胞 CCD-1095Sk human breast infilating duct carcinoma adjace skin cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS氯霉素(标准品)Chloramphenicol质量规格:>99%,标准品
PRL Protein Mouse 重组小鼠 PRL / Prolactin 蛋白 (His 标签)氯霉素(植物细胞培养级)Chloramphenicol质量规格:>99%,用于植物细胞培养
羊阔盘吸虫PCR检测试剂盒说明书人肠微内皮细胞cDNAHIMEC cDNA阿西美辛Acemetacin质量规格:>98%,BR
PLAUR Others Human 人 uPAR / CD87 人细胞裂解液 (阳性对照) N-乙酰基咪唑(>98.0%(GC)(T))N-Acetylimidazole质量规格:>98.0%(GC)(T)
3T6 Swiss albion小鼠胚胎成纤维细胞1-(七氟丁酰)咪唑(>97.0%(GC)(T))1-(Heptafluorobutyryl)imidazole 质量规格:>97.0%(GC)(T)
CL-0230Tca-8113(人舌鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2五氟苄溴(>98.0%(GC))Pentafluorobenzyl Bromide质量规格:>98.0%(GC)
MN-s, 小鼠纹状体神经元O-(2,3,4,5,6-五氟苄基)羟胺盐酸盐(>98.0%(HPLC)(N))O-(2,3,4,5,6-Pentafluorobenzyl)hydroxylamine Hydrochloride质量规格:>98.0%(HPLC)(N)
CL-0150MDA-MB-231(人癌细胞)5×106cells/瓶×24.1-66kDa低范围分子量MARKshēng huà shì jì容量:保存:-20℃5克
MN-c, 小鼠皮质神经元炳1醋异务酯(含轻醌作为稳定剂) cCRYLIC cCID ISOcMYL qSTqR 442-32-6
腺病毒转化的人胚肾细胞;AAV-293 人肾足突细胞完全培养基 100mL鸟苷 Guanosine (≥98%, cell culture tested) 118-00-3 5G 核酸衍生物
人平滑肌细胞RNAHPSMC miRNA5 μg1-溴代庚烷shēng huà shì jì容量:2~8℃250毫克
SCN2B Others Human 人 SCN2B 人细胞裂解液 (阳性对照) fonmemi7e,Deionized 100ml/250ml Amresco分装
特点优势:
1. 特异性:羊阔盘吸虫PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。