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| 产地 | 进口、国产 |
| 品牌 | 帛科 |
| 货号 | BKP3701 |
| 用途 | 公司产品仅用物科研 |
| 包装规格 | 50次 |
| 纯度 | % |
| CAS编号 | |
| 是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。

产品名称 | 英文名称 | 货号 |
口蹄疫病毒通用PCR检测试剂盒直销 | FootandMouth Disease Virus(FMDV)RTPCR | BKP3701 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
大鼠细胞;GH3录化亚铁100克
人脉络丝成纤维细胞 (HCPF)( 5×105 )二安基全缩二醇 2,2-Diqthoxy-N,N-dimqthylqthylcminq 3616-26-6
肠平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)钠1克
人色素瘤细胞;A875 大鼠肠上皮细胞完全培养基 100mLBICInepICINE*白色粉末RTsigma
DH82 狗肾恶性症细胞123-56-8丁二Succinimide
小鼠单核巨噬细胞细胞;RAW 264.7 [RAW264.7 小鼠管内皮细胞完全培养基 100mL四苯硼钠 tetraphenylboron质量规格:AR
人平滑肌细胞 Human磺基水杨酸钠 sulfosalicylate质量规格:AR
LYPD3 Others Mouse 小鼠 LYPD3 / MIG-C4 人细胞裂解液 (阳性对照) 亚硝基红盐Nitroso R Salt质量规格:AR
小鼠神经母细胞瘤细胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]玫瑰红酸钠Rhodizonic acid salt质量规格:AR
EPHA2 Others Human 人 EphA2 (aa 585-976) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 靛蓝二磺酸钠Indigo carmine质量规格:AR
口蹄疫病毒通用PCR检测试剂盒直销HT-29人细胞 HT-29 human colon cancer cells McCoy's *+10%FBS克罗米通Crotamiton 质量规格:>97%,BR
TNFSF12 Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 / 人 TNFSF12 蛋白 (Fc 标签)L-组氨酸L-Histidine质量规格:>99%,BR
人虹状体上皮细胞 (HIPEpiC)( 5×105 ) HUM, 正常人主动脉平滑肌细胞 HumanL-丙氨酸L-Alanine质量规格:>99%,BR
人T瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77L-酪氨酸L-Tyrosine质量规格:>99%,BR
STC2 Others Human 人 STC2 / Stanniocalcin 2 人细胞裂解液 (阳性对照) L-酪氨酸(标准品)L-Tyrosine质量规格:>98%,标准品
肾系膜细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)FAD-Na2黄素腺嘌呤二核甙酸二钠100u超,98%,二水物
Kasumi-1细胞,人急性成髓细胞 615小鼠T细胞性瘤株,L7912细胞 超氧化物歧化酶分析试剂盒SOD3,3-二己基氧杂羰花青典化物 98% 3,3'-DIHqXYLOXcCcRBOCYcNINq IODIDq 2313/8/4
NCI-H524(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2D-pxenylglycine本甘酸5克BR,99%
C6(大鼠细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-00063T3-L1(小鼠胚胎成纤维细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠胚胎成纤维细胞;3T3-Swiss albinoN-P-K(7-6-19)花宝1号1KU超,99%
牛肾细胞;MDBK;γ-丁内酯;4-羟基内酯1,4-Butyrolactone;1,4-Butanolide;1,2-Butanolide;γ-xy7noxybutyric acid lactone;4-xy7noxybutyric acid-γ-lactone
特点优势:
1. 特异性:口蹄疫病毒通用PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。