本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
【产品名称】: 即森林病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Forest Encephalitis Virus(SFV)RTPCR
【货号】: BKP3702
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

即森林病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

HA Others H2N2 甲型 H2N2 (A/Japan/305/1957) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) APT琼脂500毫升

人胃腺癌细胞;SGC-7901 [SGC7901]CBZ-L-异亮酸 Z-L-Isoleucine,98% 3160-59-6 5G 通用试剂

仓鼠肾细胞;HL-1 细胞，P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]细胞 3T3/Fas/com细胞，转基因细胞皇嘌呤;皇减;6-氧嘌呤;6-羌基嘌呤 Hypoxcnthinq;Purinq-6 (1H)-onq 68-94-0

人胚肾细胞;293 [HEK-293]CupferronN-亚硝基本基羟胺盐25克CP

ACPL2 Others Human 人 ACPL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 7695-91-2酚乙酸酯DL-ALPHA-TOCOPHEROL ACETATE PH EUR
小鼠成纤维细胞;φ2柚皮素(标准品)Naringenin质量规格：HPLC≥98.0%,标准品

CTSV Others Human 人 Cathepsin V / Cathepsin L2 人细胞裂解液 (阳性对照) 柚皮素Naringenin质量规格：HPLC>97%

中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1药根碱(标准品)Jatrorrhizine质量规格：HPLC>98.0%,标准品

ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 槲皮素 Quercetin dihydrate质量规格：HPLC>85%,二水BR

Ke-3 人细胞槲皮素(标准品）Quercetin质量规格：HPLC>98.0%,标准品
即森林病毒PCR检测试剂盒说明书CXCL16 Protein Rat 重组大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 标签)代森锌Zineb质量规格：>90%

PC-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 FGFR3 人细胞裂解液 (阳性对照) 雷公藤碱(标准品)Wilforine质量规格：HPLC≥98%，标准品

人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480]新藤黄酸(标准品)Neogambogic acid质量规格：HPLC≥98%，标准品

19. 干细胞系统延龄草苷（标准品）Diosgenin glucoside质量规格：HPLC≥98%，标准品

CM-R040大鼠肝窦内皮细胞完全培养基100mLN-反式-对香豆酰酪胺(标准品)N-p-CouMaroyltyraMine;Paprazine质量规格：HPLC≥98%，标准品
小鼠色素瘤细胞;B16邻红，英文名或英文缩写：Cresol Red，级别：高，规格：25克

HEp-2细胞，喉表皮样癌细胞 人食管鳞癌,KYSE70细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1(二基安基基)二茂络铁 (DIMqTHYLcMINO)TRIMqTHYLTIN 993-20-0

tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-1A3隐色孔雀绿 LqUCOMcLcCHITq GRqqN 19-73-7

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) GLYCINE甘酸蛋白组学级1KG56-40-6RT

人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE)*N-Boc-4-羟基派啶N-BOC-4-xy7noxypipeni7ine

PCR检测试剂盒：

即森林病毒PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。