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| 产地 | 进口、国产 |
| 品牌 | 帛科 |
| 货号 | BKP3689 |
| 用途 | 公司产品仅用物科研 |
| 包装规格 | 50次 |
| 纯度 | % |
| CAS编号 | |
| 是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。

产品名称 | 英文名称 | 货号 |
黄杆菌通用PCR检测试剂盒直销 | Flavobacterium spp.PCR | BKP3689 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1) 细胞,SHG-44细胞 W6/32细胞,小鼠B细胞杂交瘤细胞P-DImetxYLAMINOCINNAMALDEHYDE对二甲基肉桂醛*橙棕色粉末FRZsigma
Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞细胞 Mouse苯芴酮 Phenylfluorone,978 975-17-7 25G 通用试剂
CD99L2 Others Mouse 小鼠 CD99L2 / MIC2L1 人细胞裂解液 (阳性对照) 格拉司琼相关物质B Grcnisqtron Rqlctqd CoMpound B;N-[(1R,3r,5S)-9-Mqthyl-9-czcbicyclo[3.3.1]non-3-yl]-1H-indczolq-3-ccrboxcMidq 107007-92-4
成纤维细胞培养基-2FM-2-prfGly-Vlu甘酰-L-缬酸1克BR,98%
PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人细胞裂解液 (阳性对照) 112-34-5二乙二醇一丁;二乙二醇丁;二羟二;丁基卡别妥尔;二甘醇一丁;2-(2-丁氧基乙氧基)乙醇;二乙二醇单丁Dietxylene glycol Monobutyl ;Butyl digol;Butyl diicinol;2-(2-Butoxyethoxy)ethanol
小鼠胚胎成纤维细胞(来自NIH3T3);PA12神经肽Y(2-36),人,大鼠Neuropeptide Y (2-36) (human,rat)质量规格:>95%,BR
GGT1 Others Rat 大鼠 GGT1 人细胞裂解液 (阳性对照) 神经肽Y(22-36)Neuropeptide Y (22-36)质量规格:>95%,BR
人平滑肌细胞完全培养基 100mL神经肽Y(3-36),猪Neuropeptide Y (3-36)(porcine)质量规格:>95%,BR
M1细胞,小鼠细胞 脆弱拟杆菌 新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞;NBTF骨钙素(7-19),人Osteocalcin (7-19) (human)质量规格:>95%,BR
CXCL12 Protein Human 重组人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a)成骨生长肽Osteogenic Growth Peptide质量规格:>95%,BR
黄杆菌通用PCR检测试剂盒直销青霉素/链霉素溶液P/SL-脯氨酰胺L-Prolinamide质量规格:0.98
VEGFA Others Canine 狗 VEGF / VEGFA 人细胞裂解液 (阳性对照) L-谷氨酸(标准品)L-Glutamic acid质量规格:>99%(TLC),标准品
人急性T细胞细胞;Jurkat, Clone E6-1L-谷氨酸(sigma)L-Glutamic acid质量规格:>99%,Sigma分装
H7402细胞,人细胞 小鼠艾氏腹水癌细胞,EAC细胞 非洲绿猴肾细胞;VERO-76DL-谷氨酸DL-Glutamic acid monohydrate质量规格:>98%,水合物
MGC80-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2肌氨酸Sarcosine 质量规格:>99%,BR
ARPE-19(人视网膜上皮细胞) 5×106cells/瓶×2泛影酸钠(>98%,BC)质量规格:>98%,BC diatrizoate dihydrate
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人细胞裂解液 (阳性对照) 氟铝酸钠(>98%,BR)质量规格:>98%,BR fluoroaluminate
兔肾细胞;RK-13马尿酸钠(>98%,BR)质量规格:>98%,BR hippurate
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 钠(>95%,BR)质量规格:>95%,BR laurate
Ishikawa 人细胞吡嗪(>98.0%(GC))质量规格:>98.0%(GC)Pyrazine
特点优势:
1. 特异性:黄杆菌通用PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。