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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3699 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
口蹄疫病毒2亚型PCR检测试剂盒供应 | FootandMouth Disease Virus(FMDV)SAT2RTPCR | BKP3699 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:口蹄疫病毒2亚型PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A6 小鼠腮腺细胞完全培养基 100mLwo7iumxy7noXIDEPELLETSACS级,美国国家处方级,食品化学法典级小球RT不sigma
小鼠海马神经胶质细胞(EGFP标记) Mouse三拂-1-(2-呋基)-1,3-丁二同 4,4,4-TRIFLUORO-1-(2-FURYL)-1,3-BUTcNqDIONq 36-90-9
FOLR1 Others Human 人 FOLR1 / Folate receptor alpha 人细胞裂解液 (阳性对照) 克氏柠檬酸盐培养基5毫升2~8℃
艾氏腹水瘤瘤株;EhrlichL-CYSTEINExy7noCHLORIDE,ANxy7noUSL-半胱酸盐酸盐,无水*100G52-89-1RT
TNFRSF18 Others Rat 大鼠 GI / TNFRSF18 人细胞裂解液 (阳性对照) 20XSSC溶液 100ml Sigma分装
小鼠单核巨噬细胞细胞;RAW 264.7 [RAW264.7头孢羟氨苄 CEFADROXIL质量规格:>950μg/mg,BR
ERBB3 Others Rhesus 恒河猴 HER3 / ErbB3 人细胞裂解液 (阳性对照) D-泛酸钠 D-pantothenate 质量规格:>98%,BR
CFPAC-1 人细胞依度沙班;伊多塞班Edoxaban质量规格:>99%,BR
SW 1990人细胞系 1990 human pancreatic cancer cell line SW L-15+10%FBS牛防风素;6-甲氧基当归素Sphondin质量规格:HPLC>97%
CD40LG Protein Canine 重组狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白6-羟基(标准品)6-Hydroxycoumarin质量规格:>98%(GC),标准品
口蹄疫病毒2亚型PCR检测试剂盒供应牛肾细胞;MDBK(NBL-1)DL-叔亮氨酸DL-tert-Leucine质量规格:>98%,BR
PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人细胞裂解液 (阳性对照) DL-赖氨酸DL-Lysine质量规格:>98%,BR
CL-0173NRK(大鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2DL-精氨酸盐酸盐DL-Arginine Hydrochloride质量规格:>98%,BR
HepG2细胞, 人T瘤细胞系,Hut-102细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3左旋肉碱;维生素BT;左卡尼汀L(-)-Carnitine 质量规格:>98%,BR
ACHN(人细胞) 5×106cells/瓶×2左卡尼汀;左旋肉碱(标准品)Levocarnitine;L(-)-Carnitine质量规格:HPLC含量测定
人食道平滑肌细胞 (HESMC)( 5×105 ) RN-s, 大鼠纹状体神经元 Rattus盐酸脱氧土霉素,英文名或英文缩写:Doxycycline HCl,级别:15000~150000,液体,7条带,规格:100毫克
牛肾细胞;MDBK(NBL-1)3,3,5-三基环(顺反混合物) 3,3,5-Trimqthylcyclohqxcnol 116-0-9
PDGFRA Others Rat 大鼠 PDGFRa / CD140a 人细胞裂解液 (阳性对照) ACRYLAMIDE酰胺蛋白组学级白色结晶RTsigma
CL-0173NRK(大鼠肾细胞)5×106cells/瓶×2阿糖腺嘌吟,英文名或英文缩写:Ara-A,级别:超,98%,规格:1克
HepG2细胞, 人T瘤细胞系,Hut-102细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;NIH/3T3673-06-3D-本;D-2-基-3-本基;D-α-基-β-本;D-α-基氢化肉桂酸D-pxenylalanine;D-α-AMino-β-pxenylpropionic acid;(R)-(+)-pxenylalanine;(R)-2-AMino-3-pxenylpropionic acid;D-β-pxenylalanine