【产品名称】: 土拉热弗朗西斯菌PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Francisella tularensisPCR
【货号】: BKP3710

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

土拉热弗朗西斯菌PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

HEC-1-B细胞，人子宫内膜腺癌细胞 大鼠脑膜细胞,RMC细胞 组织源性原代细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)/1mlZ-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 50MGDRY ICE-F

H22(小鼠细胞) 5×106cells/瓶×2玫瑰红6G Bcsic Rqd 1 989-38-8

HWP visceral Pellet 人类内脏白前脂肪细胞团块 > 1 mio.cells 人真皮微内皮细胞总RNAHDMEC NAMOLWTMARKER,DNALOWRANGEI-DRYICDNA Marker生物技术级100 gFrozen

T-109B弹性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL盐酸-L-白酰-2-奈胺100克

F7 Others Mouse 小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 CHO细胞裂解液 (阳性对照) Percoll 100ml/1L 原装 Pharmacia17089101
小肠粘膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)胃泌素释放肽，猪Gastrin Releasing Peptide,procine质量规格：>95%,BR

SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人细胞裂解液 (阳性对照) 胃泌素释放肽-Lys（生物素），人Gastrin Releasing Peptide-Lys(Biotin), human质量规格：>95%,BR

大鼠胸大动脉平滑肌细胞;A7r5胃饥饿素，人Ghrelin (human)质量规格：>95%,BR

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-p7 表皮癌细胞，A-431细胞 H22-H8D8细胞，鼠细胞生长激素释放因子，大鼠GHRF, rat质量规格：>95%,BR

人胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1生长激素释放因子（1-44），人GHRF (1-44), human质量规格：>95%,BR
脑成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)头孢替坦Cefotetan acid 质量规格：Potency>960 mg,JP

PILRA Others Human 人 PILR-alpha / PILRA 人细胞裂解液 (阳性对照) AZD8055AZD-8055 质量规格：>98%,ATP竞争性的mTOR抑制剂

小鼠细胞;Fox-NYAlectinib；CH5424802CH5424802 质量规格：>98%,ALK抑制剂

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163 瘤细胞，YAC-1细胞 RSMC细胞，大鼠主动脉平滑肌细胞对甲氧基肉桂酸p-Methoxycinnamic acid 质量规格：AR,99%

人肺细胞;HLF-a5-羟基色胺盐酸盐,血清胺盐酸盐Serotonin hydrochloride(5-HT)质量规格：>97%,BR
土拉热弗朗西斯菌PCR检测试剂盒说明书人细胞;SF17对本基酚，英文名或英文缩写：4-xy7noxybipxenyl，级别：CP，95%，规格：500克

杂交瘤(B类);Z1510A2G6A2C7 急性母细胞细胞，MOLT-4细胞 H9c2(2-1)细胞，大鼠心肌细胞二醋6-羧基荧光速(-20℃) 6-CcRBOXYFLUORqSCqIN DIcCqTcTq 3348-3-6

C6, 大鼠脑细胞 Rattus6,6-二甲基-2-亚甲基-二环[3.1.1]-庚烷，英文名或英文缩写：β-Pinen，级别：BR，规格：25克

CD97 Others Human 人 CD97 人细胞裂解液 (阳性对照) 百里酚酞

尿道上皮细胞培养基UCM(2-羟基磺酸))
PCR检测试剂盒

土拉热弗朗西斯菌PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。