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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3713 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
PCR检测试剂盒直销 | Fusarium moniliformeVPCR | BKP3713 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
SLAMF6 Others Human 人 SLAMF6 / Ly108 人细胞裂解液 (阳性对照) D-乳酸脱氢酶1克保存:-20℃,避光
CL-0005293T(人胚肾细胞)5×106cells/瓶×22,6-二本安;2-安基间二本;1-安基-2,6-二本;2-安基-1,3-二基本;连间二本安 2,6-DiMqthylcnilinq;2-cMino-1,3-diMqthylbqnzqnq;vic-M-Xylidinq;2,6-Xylidinq;2-cMino-M-xylqnq;1-cMino-2,6-diMqthylbqnzqnq 1987/6/7
KB/V细胞,人口腔上皮癌长春新碱耐药株 人内皮细胞,EC-304细胞 大鼠细胞;Y3-Ag 1.2.3磺胺二5克2~8℃
BxPC-3(人原位胰腺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2嶙酸三钠100克
CN3 Others Human 人 CN3 / Coactin-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 1921-70-6姥鲛烷PRISTANE
细胞名称 种属四(戊硫代)四硫富瓦1[有机电子材料]Tetrakis(pentylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]质量规格:
GDF10 Others Mouse 小鼠 GDF10 / BMP-3B 人细胞裂解液 (阳性对照) 四(乙硫基)四硫富瓦1[有机电子材料]Tetrakis(ethylthio)tetrathiafulvalene [Organic Electronic Material]质量规格:
小鼠树突状细胞低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP双(二硫代苯偶酰)镍(II)(>95.0%(T))Bis(dithiobenzil)nickel(II)质量规格:>95.0%(T)
GP1BB Others Rat 大鼠 GP1BB / CD42c 人细胞裂解液 (阳性对照) 双(四丁铵)合双(顺丁1腈二硫醇)镍(II)(>97.0%(T))Bis(tetrabutylammonium) Bis(maleonitriledithiolato)nickel(II) Complex质量规格:>97.0%(T)
原代骨细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装:1ml四丁铵双(马来腈基二硫醇)镍(Ⅲ)络合物(>90.0%(T))Tetrabutylammonium Bis(maleonitriledithiolato)nickel(III) Complex质量规格:>90.0%(T)
PCR检测试剂盒直销小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)阿莫西林钠Amoxicillin 质量规格:>90%,BR
EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) NBD-F;4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧杂恶二唑NBD-F质量规格:>99%,进分
人癌细胞;MDA-MB-157鲁米诺,发光氨luminol质量规格:>98%
PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人细胞裂解液 (阳性对照) BAEE;N-苯甲酰基-L-精氨酸乙酯盐酸盐BAEE质量规格:>98%,BR
DU 145 人细胞ATEE;N-乙酰-L-酪氨酸乙酯N-Acetyl-L-tyrosine ethyl ester monohydrate 质量规格:>98%,BR
EAC(小鼠艾氏腹水癌细胞) 5×106cells/瓶×2wo7iummetxoxide甲氧基钠1克BR,99%
C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人细胞裂解液 (阳性对照) Lithium sulfate monohydrate,≥99.0% 10102-25-7 50G 通用试剂
人细胞;DU 145 [DU145;DU-145]GDX-501 GDX-501
SEMA4D Others Rat 大鼠 Semaphorin 4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) CalciumPyruvate焦葡萄酸钙50克BR,97%
人子宫成纤维细胞完全培养基 100mL54957-90-3盐;inoneoline sulfate
特点优势:
1. 特异性:PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。