技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：茄病镰刀菌PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
HA Others H5N2 甲型 H5N2 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 月示胨shēng huà shì jì容量：2～8℃，避光1克

溶液AMS玉米浆 Corn steep liquor 66071-94-1 500G 通用试剂

GALK1 Others Human 人 GALK1 / Galactokinase 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 乳糖蛋柏胨培养基 Lcctosq mqdium

人绒癌细胞;JEG-3TRYPSININHIBITOR,SOYBEAN胰蛋白酶抑制剂,大豆试剂级米白色冻干粉FROZENsigma

LLC Lewis细胞，细胞 人细胞,(+)9811细胞 猴肾细胞;vero IgRCD4-7784-30-71酸铝AluMinuM phosphate
豚鼠胚胎细胞;104C1紫檀芪（标准品）Pterostilbene质量规格：HPLC≥98%，标准品

LTEP-a-2细胞，人 猴肾细胞系,VERO E6细胞 CM-M050小鼠卵巢颗粒细胞完全培养基100mL紫檀芪,紫檀Pterostilbene质量规格：>99%,BR

SHG-44 (人细胞) 5×106cells/瓶×2鱼藤酮Rotenone质量规格：>90%,BR

NHEK.f-c pooled 正常人表皮角质形成细胞(NHEK)少年，混合 500,000cells 原代上皮细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1ml7-表紫杉醇（标准品）7-Epitaxol质量规格：HPLC≥98%，标准品

子宫成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)澳洲茄胺;澳州茄胺（标准品）Solasodine质量规格：HPLC≥98%，标准品
茄病镰刀菌PCR检测试剂盒直销人前脂肪细胞完全培养基 100mL海醇Iohexol质量规格：>98%,BR

MC细胞，大鼠巨噬细胞 THP-1(人单核细胞) 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4A麦芽1酸化酶, 硫酸铵悬浮液Maltose Phosphorylase 5U/mg质量规格：BC Grade

EFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His 标签)嗪草酮(>95%,植物激素级)Metribuzin质量规格：>95%,植物激素级

BC-019(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)4-甲基伞形酮酰-alpha-D-吡喃糖苷MU-alpha-GAL质量规格：分子生物学级

人卵巢腺癌细胞;SK-OV-3粘酸(>98%，BC)Mucic acid质量规格：>98%，BC
ALCAM Others Mouse 小鼠 ALCAM / CD166 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿托伐他汀甲酯质量规格：美国进口Atorvastatin Methyl Ester

肾小管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)氮卓斯汀-13C,d3质量规格：美国进口Azelastine-13C,d3

IL18RAP Others Mouse 小鼠 IL18RAP / IL1R7 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) N-去甲氮卓斯汀质量规格：美国进口N-Desmethyl Azelastine

小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C4(S)-盐酸氮卓斯汀质量规格：美国进口(S)-Azelastine Hydrochloride

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 36 细胞，C127细胞 J774A.1细胞，鼠腹水单核细胞瘤阿替洛尔-d7质量规格：美国进口Atenolol-d7