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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3732 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
肠贾第虫PCR检测试剂盒价格 | Giardia intestinalisPCR | BKP3732 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
特点优势:
1. 特异性:肠贾第虫PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
IL10RB Others Human 人 IL10Rb 人细胞裂解液 (阳性对照) 半固体琼脂shēng huà shì jì容量:500毫升
KM小鼠子瘤株;U272-酚苄基迷 2-(Phqnylmqthoxy)-ncphclqnq 613-6-7
SPG21 Others Mouse 小鼠 SPG21 / ACP33 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 录化亚锡shēng huà shì jì容量:100克
CM-M025小鼠外周血白细胞完全培养基100mLN-乙酰-L-酪酸乙酯shēng huà shì jì容量:RT5克
SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人细胞 癌细胞,MDA-MB-157细胞 Ana-1(鼠巨噬细胞)301 红色釉化担体NA
肾近曲管状上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)无水硫酸钠(分析标准品,pestizides≤1 ppm) sulfate anhydrous质量规格:分析标准品,pestizides≤1 ppm
白鲢尾鳍细胞系;SCF 人成纤维细胞,Hs 578T细胞 Acc-3(涎腺腺样囊性癌细胞)甲嘧磺隆(标准品)Sulfometuron-methyl质量规格:分析标准品
人肾上腺皮质癌细胞;SW-13西草净(分析标准品,97%)Simetryne质量规格:分析标准品,97%
GFRA3 Others Human 人 GFRA3 / GFR-alpha-3 人细胞裂解液 (阳性对照) 喹禾灵(分析标准品,96%)Quizalofop-ethyl质量规格:分析标准品,96%
双位点HC-kit受体细胞株;DMF7精喹禾灵(分析标准品,98%)Quizalofop-p-ethyl质量规格:分析标准品,98%
肠贾第虫PCR检测试剂盒价格F81 猫肾细胞4-酮基13-顺式-视黄酸4-Keto 13-cis-Retinoic Acid质量规格:美国进口
CM-M046小鼠肠上皮细胞完全培养基100mL4-酮基9-顺式视黄酸4-Keto 9-cis Retinoic Acid质量规格:美国进口
HUVEC-12, 人脐内皮细胞系4-叔丁基邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))4-tert-Butylphthalonitrile质量规格:>98.0%(GC)(N)
EB病毒转化的人B细胞;KMY0905 胎儿真皮成纤维细胞完全培养基 100mL4-丁氧基邻苯二甲腈(>95.0%(GC))4-Butoxyphthalonitrile质量规格:>95.0%(GC)
间充质干细胞培养基MSCM1,3-二亚氨基异吲哚啉(>98.0%(T))1,3-Diiminoisoindoline质量规格:>98.0%(T)
QGY-7703细胞,细胞 表皮癌细胞系,A431细胞 小鼠网织细胞;M5076PBSBUFFERWITH0.05%TWEEN20,pH7.4PBS溶液含0.05% 吐温20蛋白组学级白色颗粒粉末RTsigma
小鼠树突状细胞低转移细胞(VAP33-GFP融合蛋白稳定过表达);DG6-VAP33-GFP甜菜减;甘安醋三安内盐;三铵内盐 Bqtcinq;Lycinq;Glycocoll bqtcinq;Glycinq bqtcinq;TriMqthyl glycocoll cnhydridq;Oxynqurinq;DiMqthyl scrcosinq;(CcrboxyMqthyl)triMqthyl cMMoniuM xy7nochloridq innqr sclt;1-Ccrboxy-N,N,N-triMqthylMqthcncMiniuM innqr sclt;Bqtcinq cnxy7nous 107-43-7
CD38 Others Mouse 小鼠 CD38 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲基红 Methyl Red (pH indicator, pH 4.4 to 6.0) 493-52-7 5G 染色剂
人膀胱基质成纤维细胞裂解物HBdSFL葡甲,英文名或英文缩写:Meglumine,级别:高,98%,规格:5毫克
VEGFA Others Human 人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 人细胞裂解液 (阳性对照) L-Serine 25g/100g/250g/500g 国产
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。