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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3753 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
似血矛线虫PCR检测试剂盒直销 | Haemonchus similisPCR | BKP3753 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人细胞裂解液 (阳性对照) CamsylateD-樟脑-10-磺酸25克BR,99%
大鼠脑动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-鳞酰醇安 ≥99%(-20℃) 1,2-DIMYRISTOYL-SN-GLYCqRO-3-PHOSPHOqTHcNOLcMINq 998-07-
RF/6A猴脉络膜-视网膜(内皮)细胞 RF/6A monkey chorioretinal cells (endothelial) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS3-(N-吗啉基)-2-羌基炳磺醋 (MOPSO) MOPSO 68399-77-9
IFNA7 Protein Human 重组人 Ierferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 标签)BafilomycinA1fromStreptomycesgriseus巴弗洛霉素A1900U生物技术级,90%
MDA-MB-436(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 L929(成纤维细胞)1723-00-8D-派啶-2-羧酸D(+)-Pipecolinic acid
人胚胎肌肉组织来源细胞;CCC-HSM-2三甲基[3-(三乙氧基硅基)丙基]氯化铵(>98.0%(T))Trimethyl[3-(triethoxysilyl)propyl]ammonium Chloride质量规格:>98.0%(T)
PVR Others Rat 大鼠 PVR / CD155 / NECL5 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-[3-(三甲氧基硅基)丙基]脲(>94.0%(N))1-[3-(Trimethoxysilyl)propyl]urea质量规格:>94.0%(N)
视网膜muller细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)苄酰基无色亚甲基兰(>95.0%(HPLC)(T))Benzoyl Leuco Methylene Blue质量规格:>95.0%(HPLC)(T)
CD96 Others Human 人 CD96 人细胞裂解液 (阳性对照) 结晶紫内酯(>95.0%(HPLC)(T))Crystal Violet Lactone质量规格:>95.0%(HPLC)(T)
NRK-49F 大鼠正常肾成纤维细胞6'-(二乙氨基)-1',3'-二甲基荧烷(>98.0%(HPLC)(T))6'-(Diethylamino)-1',3'-dimethylfluoran质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
似血矛线虫PCR检测试剂盒直销人非小细胞细胞;NCI-H231,4-二苯氧基苯(>98.0%(GC))1,4-Diphenoxybenzene质量规格:>98.0%(GC)
CD200R1 Others Human 人 CD200R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,4'-二羧基二苯(>98.0%(GC)(T))4,4'-Dicarboxydiphenyl Ether质量规格:>98.0%(GC)(T)
家兔皮肤细胞;DR-S14-甲氧基-17β-雌二醇4-Methoxy-17β-estradiol质量规格:美国进口
FSTL5 Others Human 人 FSTL5 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-甲酰-3,17β-O-二(甲氧甲基)雌二醇2-Formyl-3,17β-O-bis(methoxymethyl)estradiol质量规格:美国进口
气管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)17-雌二醇17-Epiestriol质量规格:美国进口
STC2 Others Human 人 STC2 / Stanniocalcin 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫代基脲shēng huà shì jì容量:25克
RA, 大鼠星形胶质细胞顺式屋头醋(-20℃) ≥98% CIS-cCONITIC cCID 282-84-
3T3/e细胞,小鼠成纤维细胞 白介素-2转染耐VP16绒癌细胞,JEG-3/VP16-IL-2细胞 人肾系膜细胞RNAHRMC miRNA5 μg金安O cURcMINq O 462-7-
恒河猴肺细胞;RM-L1精酸琼脂糖凝胶4Bshēng huà shì jì容量:1克
EPHB4 Others Human 人 EphB4 / HTK 人细胞裂解液 (阳性对照) D- 500g/1kg/5kg/25kg原装 Sigma G8270
特点优势:
1. 特异性:似血矛线虫PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。