本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
【产品名称】: 阿古尼嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Haemophilus agniPCR
【货号】: BKP3754
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

阿古尼嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

Promocell C-28021 Hematopoietic Progenitor CellExpansion Medium DXF, 造血祖细胞扩展培养基DXF 500mlCDC厌氧菌琼脂100克

大鼠肾系膜细胞;RMC1-基硼醋 1-Ncphthylboronic ccid 139-41-3

SMAD5 Others Mouse 小鼠 Smad5 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Honda氏产毒肉汤基础100毫升

Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)Gadolinium(III)oxide三氧化二钆5克CP，97%

人脑微内皮细胞 人细胞，NCI-H520[H520]细胞 SAC-IIB2(腹水瘤细胞)二乙基己1雌酚二酸盐NA
人胚胎;WI-38三醋酸甘油酯(>98%,BR)Glycerol triacetate质量规格：>98%,BR

PIEC细胞，猪髋动脉内皮细胞 人细胞,T84细胞 CM-H061人肾小球内皮细胞完全培养基100mL甘氨酸钠(>98%,BR)Glycine  salt质量规格：>98%,BR

大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1乙醇酸(>98%,BR)Glycolic acid质量规格：>98%,BR

RK1 Others Human 人 kA / RK1 人细胞裂解液 (阳性对照) 硬脂酸单甘油酯(>98%,BR)GMS, glycerol monostearate质量规格：>98%,BR

心肌细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)氯化金Gold (III) chloride tetrahydrate质量规格：BC
阿古尼嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书CM-R006大鼠完全培养基100mL牛磺脱氧胆酸钠Taurodeoxycholic acid  salt质量规格：>97%,BR

5637, 人细胞 蓖麻蚕卵细胞,NISE-Sacy-12细胞 TE 353.Sk(人正常皮肤细胞)rU亚1酰胺单体rU Phosphoramidite质量规格：>98%,BR

小鼠肾足细胞;Mouse podocyteBz-rA亚1酰胺单体Bz-rA Phosphoramidite质量规格：>98%,BR

TNFRSF17 Others Mouse 小鼠 BCMA / TNFRSF17 人细胞裂解液 (阳性对照) i-bu-rG亚1酰胺单体i-bu-rG Phosphoramidite质量规格：>98%,BR

人导管癌细胞;ZR-75-1PF299804（EGFR抑制剂）Dacomitinib质量规格：>99%,可用于细胞培养
Raji人Butt's瘤细胞 Raji human Butt's lymphoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS葡聚糖T7shēng huà shì jì容量：50毫克

FGF12 Protein Canine 重组狗 FGF12 蛋白4-肖基-L-本炳安醋 4-nitno-3-phqnyl-L-clcninq 949-99-2

AML-193(人急性单核细胞单核细胞) 5×106cells/瓶×2 人神经细胞HN尿酸酶shēng huà shì jì容量：25克

人肾小球内皮细胞cDNAHRGEC cDNACOOMASSIEBRILLIANTBLUEG-250考马斯亮兰G-250超级蓝色至红色结晶粉末RTsigma

IFNGR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 12027-06-4化铵;化铔AMMoniuM iodide

PCR检测试剂盒：

阿古尼嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。