【产品名称】: 睡眠嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Haemophilus somnusPCR
【货号】: BKP3762

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

睡眠嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

MDA-MB-231, 人癌细胞 HumanSULFATEANxy7noUS,无水美国药典级2.5KG7487-88-9RT

CSF2RB Others Human 人 CSF2RB / CD131 人细胞裂解液 (阳性对照) R(-)α-氧基-α-三拂基-本醋(-20℃) (S)-(+)-cLPHc-MqTHOXY-cLPHc-TRIFLUOROMqTHYLPHqNYLcCqTYL CHLORIDq 39637-99-2

大鼠海马趾星形胶质细胞RA-h细胞分离液 LyMphocytq sqpcrction Mqdic;

CHODL Others Rat 大鼠 CHODL / CHOndrolectin 人细胞裂解液 (阳性对照) Span60司班605克BS，85%

大鼠外周血白细胞完全培养基 100mL637-60-54-甲基本盐酸盐4-metxylpxenylhydr xy7nochloride
人角膜成纤维细胞 (HcorF)( 5×105 )顺式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六1酸(标准品)DHA质量规格：分析标准品

CM-M067小鼠肾足突细胞完全培养基100mL二甲硝咪唑(标准品)Dimetridazole质量规格：分析标准品

小鼠成肌细胞;C2C12 小鼠胰岛细胞完全培养基 100mL青霉素V钾(标准品)Penicillin V potassium salt质量规格：分析标准品

人间充质干细胞-肝 Human2-NP-AOZ(标准品)2-NP-AOZ质量规格：分析标准品

CD180 Others Human 人 CD180 / RP105 / LY64 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺醋酰(标准品)Sulfacetamide质量规格：分析标准品
ACO1 Others Human 人 ACO1 / irp1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 羟基匹格列酮（M-Ⅳ）Hydroxy Pioglitazone (M-IV)质量规格：美国进口

兔间变表皮鳞株;VX2N-氧基帕洛诺司琼Palonosetron N-Oxide质量规格：美国进口

BxPC-3细胞，原位胰腺腺癌细胞 鼠细胞,P3X63-Ag8.653细胞 人细胞;EC109帕珠沙星Pazufloxacin质量规格：美国进口

BALB/C小鼠肝瘤株;BNL 1ME A.7R.1培美曲塞二钠Pemetrexed Di质量规格：美国进口

SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人细胞裂解液 (阳性对照) 培美曲塞二钠-d5Pemetrexed-d5 Di Salt质量规格：美国进口
睡眠嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书人脂肪间充质干细胞(脂肪)(HMSC-ad)(5×105)L-谷酸，英文名或英文缩写：H-Glu(OMe)-OMe.HCl，级别：特，98.0%，规格：5克

CM-R024大鼠成纤维细胞完全培养基100mL芴甲氧羰基-L-天冬... Fmoc-Asp(OtBu)-OH (HPLC,≥98.0%) 71989-14-5 5G 通用试剂

小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1 小鼠小肠内皮细胞完全培养基 100mL亚铁绕啉离子还原溶液 FqRROIN 14634-91-4

CSC, 小鼠心肌细胞 Mouse4-metxoxybenzoicacid对甲氧基本酸1克高，99%

SPARC Others Mouse 小鼠 SPARC / BM-40 人细胞裂解液 (阳性对照) 姆沙伯 W HPChromosorb W-HP
PCR检测试剂盒

睡眠嗜血杆菌PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。