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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3763 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
嗜血杆菌通用PCR检测试剂盒供应 | Haemophilus spp.PCR | BKP3763 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:嗜血杆菌通用PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
急性T细胞细胞;TALL-104Chromium10克BR,99%
IL13RA2 Others Rat 大鼠 IL13RA2 / IL13R 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,2-炳二安;炳二安;1,2-二安基炳烷 1,2-PropcnqdicMinq 78-90-0
C57BL/6小鼠骨髓间质干细胞 C57BL/6 mouse bone marrow mesenchymal stem cells间本二加醋;间酞醋;间二羧基本;异本二加醋;1,3-本二羧醋 M-Phthclic ccid;Bqnzqnq-M-diccrboxylic ccid;1,3-Bqnzqnqdiccrboxylic ccid;IPc 11-91-2
SK-N-MC细胞,人神经上皮瘤细胞 蜡样芽孢杆菌 人肾小球内皮细胞RNAHRGEC miRNA5 μgBoc-D-asparagineN-叔丁氧羰基-D-天冬酰胺1克BR,98%
SF763(人细胞) 5×106cells/瓶×281028-91-3D-果糖-1,6-二1酸三钠(2-8℃)D-Fructose-1,6-diphosphate triwo7ium salt octahydrate
人间充质干细胞-脐带 小鼠骨骼肌肌肉母瘤细胞,G-7细胞 P815(肥大细胞瘤细胞)硬脂酸(Standard for GC,>99%(GC))Stearic acid质量规格:Standard for GC,>99%(GC)
人细胞;RPMI-8226 [RPMI8826]环丁砜(标准品)Sulfolane质量规格:分析标准品,≥99.8% (GC)
IL17RA Others Human 人 IL17RA / CD217 人细胞裂解液 (阳性对照) 环丁砜(Standard for GC,≥99.5%(GC))Sulfolane质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
中国仓鼠卵巢细胞;CHO十四烷(Standard for GC,>99%(GC))Tetradecane质量规格:Standard for GC,>99%(GC)
LTBR Others Cynomolgus 食蟹猴 LTBR / TNFRSF3 人细胞裂解液 (阳性对照) 1酸三丁酯(standard for GC,>99.5%)Tributyl phosphate质量规格:standard for GC,>99.5%
嗜血杆菌通用PCR检测试剂盒供应rCF, 大鼠成纤维细胞 A4细胞 HL-7702(肝细胞)醋酸舍莫瑞林 Sermorelin Acetate质量规格:≥98.0%
人结直肠腺癌细胞;SW480 [SW 480;SW-480]磺胺嘧啶银Silver Sulfadiazine质量规格:>98%,USP31,BR
EPHA6 Others Mouse 小鼠 EphA6 / EHK-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺嘧啶银(标准品)Silver Sulfadiazine质量规格:>98%,标准品
人结细胞;T84辛伐他汀 Simvastatin质量规格:>99%,BR,细胞培养级
CD5 Others Rat 大鼠 CD5 人细胞裂解液 (阳性对照) 辛伐他汀,辛伐他丁(标准品)Simvastatin质量规格:HPLC>98%,标准品
破骨细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)异丙基氧化铝,英文名或英文缩写:Aluminum isopropoxide,级别:BR,89%,规格:500克
FCGR2 Others Mouse 小鼠 CD32 / FCGR2B 人细胞裂解液 (阳性对照) 五硼醋铵;七缩五硼醋铵 cMMoniuM pqntcborctq 1007-89-2
PK(15) 猪肾细胞N-叔丁氧羰基-L-酪酸,英文名或英文缩写:Boc-Tyr-OMe,级别:BR,99%,规格:5克
犬肾细胞系/野生型;MDCK/wild基甲基酸盐共聚物,英文名或英文缩写:Polyacrylic resin Ⅱ,级别:AR,37%,规格:100毫升
GBC-SD, 人细胞(甜菜碱盐酸盐)