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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3765 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
金黄地鼠病毒PCR检测试剂盒直销 | Hamster Leukemia VirusRTPCR | BKP3765 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B2/A1) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2.0ml离心管shēng huà shì jì容量:1KU
CL-0241VCaP(人细胞)5×106cells/瓶×21-氧基2-炳醇 1-Mqthoxy-2-propcnol 107-98-
HUVEC-12, 人脐内皮细胞系 昆虫卵巢细胞,SF9细胞 NK-92(人恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞)蚕蛹蛋白胨shēng huà shì jì容量:保存:-20℃100毫克
人导管癌细胞;ZR-75-30Zincphosphatemonobasic嶙酸二氢锌100克AR,99%
CHIT1 Others Human 人 CHIT1 / Chitinase-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 596-03-24,5-二溴荧光素4',5'-DIBROMOFLUORESCEIN
人急性T细胞细胞;Jurkat, Clone E6-1异鲁米诺(>98.0%(HPLC)(T))Isoluminol质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
IL18R1 Others Mouse 小鼠 IL18R1 / CD218a 人细胞裂解液 (阳性对照) 草酸双[2,4,5-三氯-6-(戊氧羰基)苯基]酯(>98.0%(HPLC))Bis[3,4,6-trichloro-2-(pentyloxycarbonyl)phenyl] Oxalate质量规格:>98.0%(HPLC)
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA8-氨基-1,3,6-萘三磺酸二钠盐水合物(>99.0%(HPLC)(T))Di 8-Amino-1,3,6-naphthalene 3sulfonate Hydrate质量规格:>99.0%(HPLC)(T)
ROBO2 Others Human 人 ROBO2 人细胞裂解液 (阳性对照) 102(>97.0%(HPLC)(N))Coumarin 102质量规格:>97.0%(HPLC)(N)
成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml) 314(>98.0%(HPLC)(N))Coumarin 314质量规格:>98.0%(HPLC)(N)
金黄地鼠病毒PCR检测试剂盒直销人胚肺二倍体细胞;HL橙皮苷(标准品)Hesperidin质量规格:HPLC≥98%,标准品
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) 橙皮苷Hesperidin质量规格:HPLC≥90%,BR
人间充质干细胞-骨髓总RNAHMSC-bm NA橙皮素(标准品)Hesperitin质量规格:HPLC≥98%,标准品
PARP1 Others Mouse 小鼠 PARP-1 / PARP 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 虫草素(标准品)Cordycepin质量规格:HPLC≥98%,标准品
家猫肺细胞;FCA-L1川陈皮素;蜜橘黄素Nobiletin质量规格:HPLC≥98%,BR
人骨骼肌成肌细胞cDNAHSkMM cDNA1,4-α-D-葡聚糖麦芽水解酶,英文名或英文缩写:β-Amylase,级别:BR,4000u/g,规格:5克
GPNMB Others Human 人 GPNMB / HGFIN 人细胞裂解液 (阳性对照) 3,4’-二安基二本迷 3,4'-Oxydicnilinq 627-87-6
3T3?L1 小鼠脂肪细胞N-DODECYL-β-D-MALTOSIDEN-十二烷基-β-D-麦芽糖苷*白色粉末FROZENsigma
CL-0246YAC-1(小鼠瘤细胞)5×106cells/瓶×2肝嶙脂钠盐,英文名或英文缩写:Heparin wo7ium salt,级别:BR,1500-3000u/mg,规格:1克
rCF, 大鼠成纤维细胞10318-18-0DL-半胱酸盐酸盐;DL-2-基-3-酸盐酸盐DL-Cysteine xy7nochloride
特点优势:
1. 特异性:金黄地鼠病毒PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。