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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3781 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
亨德拉病毒PCR检测试剂盒直销 | Hendra VirusRTPCR | BKP3781 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:亨德拉病毒PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
EB病毒转化的人B细胞;Mao 人骨骼肌细胞完全培养基 100mLCAPSTRANSFERBUFFER,10XCAPS, 转移缓冲液 10X蛋白组学级500MLCOLD
色素细胞培养基-2(不含TPA)MelM-2(+/-)-反式-1.2-二安基环 (+4℃) (+/-)-trcns-1,2-Dicminocyclohqxcnq 111--8
FKBP7 Others Human 人 PPIase / FKBP7 人细胞裂解液 (阳性对照) 减式碳醋 Lqcd(II) ccronctq bcsic 1319-46-6
大鼠胰腺导管上皮细胞完全培养基 100mLValinomycin基霉素1克USP级,γ-射线灭菌,10mg/ml
NCI-H266人非小细胞细胞 NCI-H266 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS6106-21-4丁二酸钠Diwo7ium succinate hexahydrate
颅盖造骨细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)乙酸苄酯(标准品)Benzyl acetate质量规格:分析标准品,≥99.7%(GC
RAMOS(RA.1)细胞,人B细胞瘤细胞 小鼠癌细胞株,EMT-6细胞 人小梁网细胞裂解物HTMCL苄嘧磺隆(标准品) Bensulfuron-methyl质量规格:分析标准品
NCI-H446(人小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2草除灵(标准品)Benazolin-ethyl ester质量规格:分析标准品,98.5%
CHL(仓鼠肺细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0110HL-60(人早幼粒急性细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-B13,4-苯并芘(标准品)3,4-Benzopyrene质量规格:分析标准品
中国仓鼠肺细胞;R 1610 [R1610]1,3-丁二醇(标准品) (±)-1,3-Butanediol质量规格:分析标准品
亨德拉病毒PCR检测试剂盒直销CL-0437SF763(人细胞)5×106cells/瓶×2草甘膦标准溶液(10μg/ml,u=2%)N-(Phosphonomethyl)glycine solution质量规格:10μg/ml,u=2%
细胞名称 M-37细胞 G-7(小鼠骨骼肌肌肉母瘤细胞)辛(分析标准品,99%)Phoxim质量规格:分析标准品,99%
人细胞;Hela P10s-11F除草标准溶液(10μg/ml,u=5%)Nitrofen solution质量规格:10μg/ml,u=5%
DLL4 Others Human 人 DLL4 / Delta4 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-萘氧乙酸(标准品)2-Naphthoxyacetic acid质量规格:分析标准品
人急性母细胞性细胞;MOLT-4灭菌丹标准溶液(100μg/ml,u=2%)N-(Trichloromethylthio)phthalimide solution质量规格:100μg/ml,u=2%
HUVEC-12, 人脐内皮细胞系Bathopxenanthroline4,7-二本基邻咯啉100毫克CP,97%
人Burkkit瘤细胞;Daudi 大鼠肾小球内皮细胞完全培养基 100mL本醇 BqNZYL cLCOHOL 100-21-6
MMQ 小鼠细胞葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-100 Superfine 9050-94-6 100G 分离试剂
FETUB Others Human 人 Fetuin-B / FETUB 人细胞裂解液 (阳性对照) AcidicProtease酸性蛋白酶100克生物技术级,1u/mg
人非小细胞;NCI-H1975(顺二酸(马来酸))