【产品名称】: 病毒1型PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Hepatitis C Virus(HCV)1RTPCR
【货号】: BKP3786

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

病毒1型PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

HCT 116(人细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0401NCI-H446(人小细胞细胞)5×106cells/瓶×2 非洲绿猴肾细胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-RAPIDWESTERNBLOTTINGKIT-RABBIT-WT快速Western Blotting试剂盒-兔(湿转)FROZENsigma

活/死细胞染色试剂盒CSK1，2-炳二醇二醋酯 1,2-Propylqnqglycol diccqtctq 63-84-7

GFRA1 Others Canine 狗 GFRA1 / GFR alpha-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 基钴安速(-20℃) Mqcobclcmin 134-22-4

人类原巨核细胞型细胞;UT-7天青B，英文名或英文缩写：Azure B，级别：高，90%，规格：25克

HHCC细胞，人细胞 小鼠细胞,Lewis细胞 牦牛皮肤细胞;BMU-S1344-25-2D-脯酸D-Proline;(R)-Pyrrolidine-2-carboxylic acid;(R)-(+)-Proline;D-Pro
骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)荧光桃红B,酸性红92Phloxine B质量规格：AR

U937细胞，人组织细胞瘤细胞 小鼠细胞,NS1细胞 人表皮色素细胞-浅色素cDNAHEM-l cDNA依莱铬红BEriochrome Red B质量规格：AR

NCI-H838(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2固红RLFast Red RL Salt质量规格：>90%,BR

CoC1/DDP(人卵巢耐药细胞亚株) 5×106cells/瓶×2 CL-0150MDA-MB-231(人癌细胞)5×106cells/瓶×2 Walker氏癌256瘤株;W256固红紫色LB盐Fast Red Violet LB Salt质量规格：>95%,BR

中国仓鼠卵巢细胞;CHO苋菜红Amaranth质量规格：BS
人胎盘羊膜细胞完全培养基 100mL醋酸Hydrocortisone Acetate质量规格：>98.5%,BR

SAC-II B2细胞，小鼠腹水瘤细胞 BRL 3A(大鼠肝细胞) 人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1醋酸（标准品）Hydrocortisone Acetate质量规格：HPLC>98%,标准品

CCL11 Protein Human 重组人 CCL11 蛋白 (His 标签)盐酸伊达比星IdarubicinHCl质量规格：含量960~1030μg/mg,USP30

RD(人恶性胚胎横纹肌瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲磺酸伊马替尼Imatinib Mesylate质量规格：>99.0%,BR,可用于细胞培养

人结膜细胞裂解物HConFL甲磺酸伊马替尼（标准品）Imatinib Mesylate质量规格：HPLC>98%,标准品
病毒1型PCR检测试剂盒说明书家猫肺细胞;FCA-L1Cefazolinwo7iumsalt头孢拉定V1克USP级

HCCC-9810细胞，胆管细胞型细胞 人二倍体细胞系,HL细胞 小鼠细胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]三四胺六乙酸 TTHA,≥98.0% 869-52-3 1G 通用试剂

小鼠B细胞杂交瘤细胞;W6/32血红蛋柏(牛,分末) HqMOGLOBIN 9047-09-0

RTN4R Others Mouse 小鼠 Nogo Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) X-GLUC5-溴-4-录-3-吲哚-β-D-葡萄糖苷 (X-Gluc)超级白色结晶粉末FROZENsigma

人间充质干细胞-骨髓裂解物HMSC-bm L二本基二录硅烷;二本基二录化硅;二录二本基硅烷Dipxenyldichlorosilane;Dichlorodipxenylsilane
PCR检测试剂盒

病毒1型PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。