PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：庚型肝炎病毒PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

HA Others H9N2 甲型 H9N2 (A/Guinea fowl/Hong Kong/WF10/99) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) TERRIFICBROTH,POWDER*肉汤, 粉末生物技术级100GRT

HL-60, 人早幼粒细胞钼醋铵;四水合钼醋铵;七钼醋铵;仲钼醋铵 cMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq;Molybdic ccid cMMoniuM sclt tqtrchydrctq;cMMoniuM hqptcMolybctq;HqxccMMoniuM hqptcMolybdctq tqtrchydrctq 1024-82-

IL17RA Others Mouse 小鼠 IL17RA / IL17R / CD217 人细胞裂解液 (阳性对照) H-Glu-PNAL-谷酰基-4-硝基本胺100毫克BR，98%

EB病毒转化的人B细胞(傣族);KM9405胞嘧啶25克

GP2-293Luc细胞，人胚肾上皮包装细胞 绿猴恒河猴肾细胞,LLC-MK2细胞 CL-0348Hce-8693(人盲肠腺癌细胞(未分化))5×106cells/瓶×2(猪胆盐)
大鼠肾小球内皮细胞完全培养基 100mL双甘氨二肽Gly-Gly质量规格：>99%,BR

PC 61 5.3 [PC 61; PC 61.5.3]杂交瘤细胞CD25 PC 615.3 [PC 61; PC 61.5.3] hybridoma cell line CD25 DMEM+10% Hyclone 灭活血清重组人胰岛素Human recombinant Insulin质量规格：效价测定

IGFBP7 Protein Human 重组人 IGFBP7 / IBP-7 蛋白 (His 标签)人胰岛素Human Insulin质量规格：测定用

HAN(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×2 雪旺细胞培养基SCM硝酸舍他康唑Sertaconazole nitrate质量规格：>98%,BR

肾小球内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)醋酸依降钙素 Elcatonin Acetate质量规格：BR
庚型肝炎病毒PCR检测试剂盒供应ME-180 人子宫颈表皮癌细胞4-(己氧基)苯(>98.0%(GC))4-(Hexyloxy)benzaldehyde质量规格：>98.0%(GC)

NCI-H292人细胞(结转移) NCI-H292 human lung cancer cells (lymph node metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS4-庚氧基苯(>98.0%(GC)(T))4-Heptyloxybenzaldehyde质量规格：>98.0%(GC)(T)

KITLG Protein Mouse 重组小鼠 SCF / C-kit ligand 蛋白 (His 标签)4-差向-地美环素4-epi-Demeclocycline质量规格：美国进口

人葡萄膜色素细胞;UM 人气管平滑肌细胞完全培养基 100mL头孢喹诺Cefquinome质量规格：美国进口

急性T细胞细胞;TALL-104头孢噻呋Ceftiofur质量规格：美国进口
IFNAR2 Others Human 人 IFNAR2 / IFNABR 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,3,6,7,10,11-六甲氧基三亚苯(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)2,3,6,7,10,11-Hexamethoxytriphenylene

人细胞;Hela2,3,6,7,10,11-六羟基三亚苯水合物(>95.0%(HPLC))质量规格：>95.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexahydroxytriphenylene Hydrate

APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2,3,6,7,10,11-六乙酰氧基三亚苯(>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)2,3,6,7,10,11-Hexaacetoxytriphenylene

CL-0421RAG(小鼠肾腺癌细胞)5×106cells/瓶×22,3,6,7,10,11-六溴三亚苯(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)2,3,6,7,10,11-Hexabromotriphenylene

人羊膜上皮细胞 双位点HC-KIT受体细胞株，DMF7细胞 BLO-11(小鼠骨骼成纤维细胞)1-溴-4-正辛基苯(>90.0%(GC))质量规格：>90.0%(GC)1-Bromo-4-n-octylbenzene
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。