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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3805 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
高地病毒PCR检测试剂盒直销 | Highlands J VirusJRTPCR | BKP3805 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:高地病毒PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人细胞裂解液 (阳性对照) CIN-1I培养基50克
人上皮细胞完全培养基 100mL4-安基偶氮本;队安基偶氮本;安泥林皇;本安皇;队安基二本基亚安;队本基偶氮本安 4-cMinoczobqnzqnq;p-cMino-czobqnzqnq;p-cMinodiphqnyliMidq;cnilinq yqllow;Spirit yqllow;Oil yqllow B;p-Phqnylczocnilinq;C.I.11000; 1960-9-3
U2OS-Luc teT-on细胞,荧光素酶转染人成细胞 枯草芽孢杆菌 小鼠肾集合管细胞(SV40转化);M-1聚乙酸酯50克RT
CCL3 Protein Human 重组人 CCL3 / Mip1a 蛋白 (His 标签)TotalBLOTSOUTHERNKITWITHMEMBRANESOUTHERN 试剂盒(含膜)生物技术级RTsigma
LoVo(人细胞) 5×106cells/瓶×2 人 EDNRB / Endothelin B Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 4号琼脂NA
大鼠肝细胞;BRL 3A托伐普坦 Tolvaptan质量规格:度≥99.0%,BR,可用于细胞培养
GDF15 Others Human 人 GDF-15 人细胞裂解液 (阳性对照) 磺胺噻唑Sulfathiazole质量规格:>99%,BR
小鼠胚胎成纤维细胞MEF磺胺噻唑(标准品)Sulfathiazole质量规格:含量测定
MARK3 Others Human 人 MARK3 / CTAK1 / EMK-2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 环苯扎林盐酸盐Cyclobenzaprine HCl质量规格:>99%,BR
人胚肝二倍体细胞;CCC-HEL-1盐酸美托咪定Medetomidine HCl质量规格:≥99.0%,BR
高地病毒PCR检测试剂盒直销HCT116/L 人耐奥沙利铂耐药株alpha-熊果苷(标准品)alpha-Arbutin 质量规格:HPLC≥98%,标准品
SEMA4D Others Mouse 小鼠 Semaphorin-4D / SEMA4D / CD100 人细胞裂解液 (阳性对照) L-羟基脯氨酸(标准品)L-Hydroxyproline质量规格:HPLC≥98%,标准品
人APP-PS1(C410Y)双基因转染细胞株;7WCY1.0L-羟基脯氨酸L-Hydroxyproline质量规格:>99%,BR
SDC1 Others Rat 大鼠 Syndecan-1 / SDC1 / CD138 人细胞裂解液 (阳性对照) L-正亮氨酸L-Norleucine质量规格:>98%,BR
人脐带单核细胞完全培养基 100mLFmoc-D-4-苯丙氨酸Fmoc-4-iodo-D-Phe-OH质量规格:HPLC>98%
Promocell C-28051 Monocyte Attachme Medium, 单核细胞附着培养基(即用型) 250ml薄荷醇(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Menthol
人上皮样细胞;BEAS-2B补骨脂定(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Psoralidin
DCBLD2 Others Human 人 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 人细胞裂解液 (阳性对照) 补骨脂二氢黄酮;补骨脂甲素质量规格:HPLC≥98%,标准品Bavachin
CL-0368INS-1(大鼠胰岛细胞瘤细胞)5×106cells/瓶×2补骨脂酚(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Bakuchiol
EL4IL-2细胞,瘤细胞 人急性早幼粒细胞,NB4细胞 人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE)D-(-)-奎宁酸(标准品)质量规格:≥98%,标准品D-(?)-Quinic acid