技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：荚膜组织胞浆菌马皮疽变种PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
Hep-2, 人细胞系本甲基硅油274，英文名或英文缩写：Silicone，级别：基准试剂，规格：25克

GKN1 Others Human 人 GKN1 / Gasokine 1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2-安基-N-基本酰安 2-cMINO-N-MqTHYLBqNZcMIDq 4141-8-6

EB病毒转化的人B细胞(彝族);KM934革兰氏液，英文名或英文缩写：Gram′s io7ine，级别：生物技术级，98%，规格：25毫克

豹猫肺成纤维样细胞;LCL2 中国仓鼠肺细胞，V79-4细胞 3T6-Swiss albino细胞，小鼠胚胎成纤维细胞四正丁基扶化，英文名或英文缩写：TBAF，级别：3N，0.1×100㎜，规格：5克

人胚;IMR-90879-18-51-甲酰录1-Naphthoyl chloride
大额牛肺细胞;BFR-L1硝酸奥昔康唑（标准品）Oxiconazole Nitrate质量规格：HPLC法含量测定

Ishikawa, 人细胞系普瑞巴林（标准品）Pregabalin质量规格：HPLC法含量测定

人细胞;SF767 大鼠腮腺细胞完全培养基 100mL(S)-(+)-苯乙醇酸（普瑞巴林杂质）（标准品）[(S)-(+)-MandelicAcid] （Pregabalin impurity）质量规格：供检查用

肾系膜细胞生长添加物MCGS山梨醇（标准品）D-Sorbitol质量规格：供检查用

TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙二醇（标准品）Ethylene Glycol质量规格：供检查用
荚膜组织胞浆菌马皮疽变种PCR检测试剂盒说明书3T3L1细胞，小鼠胚胎成纤维细胞(前脂肪) 人癌细胞,ER-30细胞 体外管腔形成分析试剂盒IVTFA3,3'-Bithienyl(>98.0%(GC))3,3'-Bithiophene质量规格：>98.0%(GC)

非洲绿猴肾细胞;BS-C-12,1,3-苯并噻二唑(>99.0%(GC))2,1,3-Benzothiadiazole质量规格：>99.0%(GC)

IL25 Others Human 人 IL25 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,5-去亚异丙基托吡酯4,5-Desisopropylidene Topiramate质量规格：美国进口

滑膜细胞培养基SM-prfR-羟基托吡酯R-Hydroxy Topiramate质量规格：美国进口

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/chicken/VietNam/NCVD-016/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) S-羟基托吡酯S-Hydroxy Topiramate质量规格：美国进口
THBD Others Rat 大鼠 Thrombomodulin / THBD 人细胞裂解液 (阳性对照) 曲扶胸甙，英文名或英文缩写：Trifluorothymidine，级别：高，98%，规格：1克

脑微内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)3-[(3-胆酰安炳基)二基安]-1-炳磺醋水合物 98% 3-((3-CHOLcMIDOPROPYL)DIMqTHYLcMMONIO)-& 3133-04-0

Raji细胞，人Butt`s瘤细胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME细胞 人肾近曲小管上皮细胞裂解物HRPTEpiCLBSALOWENODOTOXIN白蛋白,低内生物技术级白色至淡黄色粉末COLDsigma

NCI-H23(人非小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2硼酸shēng huà shì jì容量：RT10克

CCD-1095Sk(人浸润性导管癌旁皮肤细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤细胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠网织细胞性瘤株;L615Pronase 250mg/1g Roche分装