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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3789 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
病毒4型PCR检测试剂盒直销 | Hepatitis C Virus(HCV)4RTPCR | BKP3789 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞;PC-12 [PC12]盐酸甜菜碱,英文名或英文缩写:Betaine HC1,级别:高,96%,规格:1克
CD79B Others Rat 大鼠 CD79B / B29 人细胞裂解液 (阳性对照) 肖醋铯(易制暴) Cqsium nitnctq 7789-18-6
人上皮细胞完全培养基 100mLD-SORBITOLD- 山梨醇*白色颗粒粉末RTsigma
Tca8113-P60细胞,人舌癌细胞系 铜绿假单胞菌 大鼠肝细胞;BRL 3A3,4-Dixy7noxybenzoicacid原儿茶酸100毫克超,99%
CCL23 Protein Human 重组人 CCL23 / MIP 3 蛋白5-Bromo-2'-Deoxyuridine 250mg/1g Sigma分装
非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C三丁基化锍(>96.0%(T))Tributylsulfonium Iodide质量规格:>96.0%(T)
UM-UC-3, 人膀胱移行细胞癌螺[1,3,3-三甲基吲哚苯并二氢吡喃][光致变色化合物](>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinobenzopyrylospiran [Photochromic Compound]质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
人急性母细胞性细胞;MOLT-4 大鼠肺动脉成纤维细胞完全培养基 100mL1,3,3-三甲基吲哚-奈谔嗪(>98.0%(HPLC)(T))1,3,3-Trimethylindolinonaphthospirooxazine [Photochromic Compound]质量规格:>98.0%(HPLC)(T)
心房肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)3,3-二苯基-3H-萘并[2,1-b]吡喃(>98.0%(HPLC))3,3-Diphenyl-3H-naphtho[2,1-b]pyran质量规格:>98.0%(HPLC)
C7 Others Human 人 C7 / Compleme compone 7 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫靛红Thioindigo质量规格:
病毒4型PCR检测试剂盒直销PANC-1细胞,人细胞 人横纹癌细胞,A673细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;MEFPR171关键中间体IVBoc-HPh-Leu-Phe-Ome质量规格:>97%
HO-8910(人细胞) 5×106cells/瓶×2Pneumadin,大鼠Pneumadin (rat)质量规格:>95%,BR
Cellgro 25-072-CI Lymphocyte Separation Medium(人细胞分离液) 100ml朊病毒肽(106-126),人Prion Peptide (106-126),Human质量规格:>95%,BR
人成纤维细胞裂解物HMFL前肾上腺髓质素(1-20),人Proadrenomedullin (1-20)(human)质量规格:>95%,BR
AGO3 Others Human 人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 前肾上腺髓质素(45-92),人Proadrenomedullin (45-92)(human)质量规格:>95%,BR
SERPINA12 Protein Human 重组人 Vaspin / SerpinA12 蛋白 (His 标签)钙100克
293来源病毒包装细胞;ΦA-GP 人成纤维细胞完全培养基 100mL录铂醋(+4℃) CHLOROPLcTINIC cCID HqXcHYDRcTq 18497-13-7
人癌细胞;MDA-MB-468甘油 (细胞培养级) Glycerol (cell culture tested, ≥99%) 56-81-5 100ML 通用试剂
人脂肪细胞-皮下(HPA-s)(1×106 )EOSINYwo7iumSALT伊红Y钠生物染料级橙红色粉末RTsigma
CM-R080大鼠大隐内皮细胞完全培养基100mLD-Trehalose 5g/10g/250g原装 Sigma T5251
特点优势:
1. 特异性:病毒4型PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。