本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。
【产品名称】: 病毒5型PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Hepatitis C Virus(HCV)5RTPCR
【货号】: BKP3790
【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

病毒5型PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) TBHB3-羟基-2,4,6-三溴本酸sigma

CL-0205Sf-9(昆虫细胞)5×106cells/瓶×210-脱酰基巴卡丁III 10-Dqccqtylbcccctin III 3981-86-2

Dami细胞，巨核细胞 人分泌A2抗体B细胞,BB7.2细胞 人导管癌细胞;HCC382-本加醋酯 Mqthyl o-toluctq 89-71-4

A673(人横纹肌瘤细胞) 5×106cells/瓶×2L-丝酸盐酸盐，英文名或英文缩写：H-Ser-OmeoHCl，级别：特，98%，规格：5克

PVRL2 Others Human 人 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 59-14-35-溴-2’-脱氧尿苷(-20℃)Broxuridine
非洲绿猴肾细胞;VERO银杏酸C15:1Ginkgolic Acid C15:1质量规格：HPLC≥80%，美国进口

ICAM2 Others Human 人 ICAM-2 / CD102 人细胞裂解液 (阳性对照) 银杏酸C13:0，白果酸C13:0Ginkgolic Acid C13:0质量规格：HPLC≥98%，标准品

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4BAZD9291AZD-9291(free base)质量规格：>98%,EGFR抑制剂

KCT2 Others Human 人 KCT2 / C5orf15 人细胞裂解液 (阳性对照) AZD9291 MesylateAZD-9291 mesylate质量规格：>98%,EGFR抑制剂

CL-0061CHO(仓鼠卵巢细胞)5×106cells/瓶×2乳酸链球菌素;乳链菌肽;尼生素Nisin质量规格：BR,效价>900IU/MG
病毒5型PCR检测试剂盒说明书RSC96(大鼠雪旺细胞) 5×106cells/瓶×2醋氯芬酸（标准品）Aceclofenac质量规格：UV法含量测定

Gibco 10902088 Sf-900 II SFM 1000mlTG101209TG-101209;TG 101209质量规格：>98%，选择性JAK2抑制剂

人角膜细胞总RNAHK NA盐酸阿扎司琼（标准品）Azasetron Hydrochloride质量规格：含量测定

小鼠颗粒神经元(MGC)(1×106)盐酸普萘洛尔（标准品）Propranolol Hydrochloride质量规格：溶出度检查

猫源细胞美他多辛（标准品）Metadoxine质量规格：HPLC法含量测定
人神经少突起前质胶质细胞完全培养基 100mLMalonicacid胡萝卜酸50毫克BR

JB6-C30细胞，小鼠皮肤细胞 J82(细胞) 犬肾细胞;MDCK/IgR3-溴-1-炳醇 3-BroMo-1-propcnol 67-18-9

EFNA1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (His 标签)litxiumacetatedihydrate醋酸100克4N，99.99%

CAL-27(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 原代骨细胞特制无血清添加剂Many types of cells包装：1mlBentonite膨润土5克BR，99%

人骨骼肌成肌细胞HSkMM109-76-21,3-二基1,3-Diaminopropane

PCR检测试剂盒：

病毒5型PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。