单纯病毒2型PCR检测试剂盒说明书【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

【产品名称】: 单纯病毒2型PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Herpes Simplex Virus(HSV)2PCR
【货号】: BKP3798
组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

单纯病毒2型PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 人细胞裂解液 (阳性对照) ，英文名或英文缩写：wo7ium metasilicate nonahydrate，级别：CP，70%，规格：5克

SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7胆红速(+4℃) Bilirubin 632-62-4

EPHA7 Others Human 人 EphA7 / EHK3 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 1-溴代，英文名或英文缩写：1-Bromooctane，级别：AR，47.8%，规格：100克

CL-0225SW620(人细胞)5×106cells/瓶×2BOC-Nim-苄基-L-组酸5克RT，避光

HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞 小鼠T细胞瘤(SV40T抗原转染)，Cyc-tAg细胞 HMy2.CIR(人B 母细胞)Peptonepacto 100g/500g原装 BD 211677
大鼠肾系膜细胞;RMC塞来昔布羧酸Celecoxib Carboxylic Acid质量规格：美国进口

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS2 细胞，HeLa 229细胞 EAC-E2G8细胞，鼠腹水瘤4'-反式-羟基西洛他唑4'-trans-Hydroxy Cilostazol质量规格：美国进口

人胚胎心肌组织来源细胞;CCC-HEH-23,4-脱氢西洛他唑3,4-Dehydro Cilostazol质量规格：美国进口

POSTN Others Mouse 小鼠 POSTN / OSF2 人细胞裂解液 (阳性对照) 西洛他唑-d11Cilostazol-d11质量规格：美国进口

胃粘膜上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)去二甲基氯化西酞普兰盐酸盐Didemethylchloro Citalopram Hydrochloride质量规格：美国进口
脑动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)苝(升华提)(>99.0%(GC))Perylene (purified by sublimation)质量规格：>99.0%(GC)

CA46细胞，人Butts瘤细胞系 小鼠Lewis瘤株,LLT细胞 人肝脏星形细胞裂解物HHSteCL1,1,4,4-四苯基-1,3-丁二1(>99.0%(HPLC))1,1,4,4-Tetraphenyl-1,3-butadiene质量规格：>99.0%(HPLC)

NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞) 5×106cells/瓶×28-羟基米氮平β-D-葡萄糖苷酸8-Hydroxy Mirtazapine β-D-Glucuronide质量规格：美国进口

CCRF-CEM(人急性细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0094HCC827(人非小细胞细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠树突状细胞低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP8-羟基米氮平8-Hydroxy Mirtazapine质量规格：美国进口

绿色荧光蛋白标记小鼠前细胞;MFC-GFPN,N-二乙酰 去-5'-氯-4-氟代苄基莫沙必利N,N-Diacetyl Des-5'-chloro-4-fluorobenzyl Mosapride质量规格：美国进口
单纯病毒2型PCR检测试剂盒说明书Hut-102(人皮肤T瘤细胞) 5×106cells/瓶×2(R)-(+)-4'-羟苯基卡维地洛质量规格：美国进口(R)-(+)-4'-Hydroxyphenyl Carvedilol

Promocell C-22020 Endothelial Cell GrowthMedium MV, 内皮细胞生长培养基MV(即用型) 500ml4'-苄氧基卡维地洛质量规格：美国进口4'-Benzyloxy Carvedilol

人食道上皮细胞裂解物HEEpiCL卡维地洛-甲基-d3质量规格：美国进口Carvedilol-methyl-d3

HEXA Others Human 人 Hexosaminidase A / HEXA Subunit A 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 卡维地洛β-D-葡萄糖苷酸(mixture of diasteromers)质量规格：美国进口Carvedilol β-D-Glucuronide (mixture of diasteromers)

人结直肠腺癌细胞;HCT-15 [HCT15](S)-(-)-1-苯乙醇(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)(S)-(-)-2-Methyl-1-butanol

PCR检测试剂盒

 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。