PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：火鸡病毒PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

IL18BP Others Mouse 小鼠 IL18BP 人细胞裂解液 (阳性对照) H295EstersilH295硅酯500毫升BR，99%

MTT细胞活力和增殖检测试剂盒MTT4-羌基本加醋丁酯;队羌基本加醋丁酯;泥泊金丁酯 Butyl 4-xy7noxybqnzoctq;4-xy7noxybqnzoic ccid butyl qstqr;Butobqn;Nipcgin;Butylpcrcbqn;Butyl chqMosqpt;Butyl pcrcsqpt 1994/6/8

CD2 Others Canine 狗 CD2 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,8-二氮双环[5.4.0... 1,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-ene (≥... 6674-22-2 25ML 通用试剂

人上皮细胞;Ca SkiTRIS-TAPS-EDTA(TTE)POWDERBLENDTTE缓冲液,10X 粉末包超级1 PackRT

杂交瘤(B类);C3110D2E11 细胞，Lncap细胞 H4-II-E-C3细胞，大鼠肝细胞瘤6160-65-21，1-硫代羰基二咪唑1,1'-Thiocarbonyldiimidazole
大鼠胚胎心肌细胞;H9c2(2-1)五味子乙素(标准品)Schizandrin B质量规格：HPLC≥98%，标准品

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS3 细胞，RH-35细胞 EL-4细胞，小鼠瘤五味子酯甲(标准品)Schisantherin A质量规格：HPLC≥98%，标准品

人胚胎肠粘膜组织来源细胞;CCC-HIE-2西贝母碱（标准品）Sipeimine质量规格：HPLC≥98%，标准品

PVR Others Cynomolgus 食蟹猴 PVR / CD155 人细胞裂解液 (阳性对照) 西红花苷，α-藏花素(标准品)Crocin质量规格：HPLC≥98%，标准品

胎盘绒毛膜细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)西红花苷I（标准品）Crocin I质量规格：HPLC≥97%，标准品
火鸡病毒PCR检测试剂盒价格GHR2 金黄地鼠肋骨来源细胞三七皂苷R2(S型)(标准品)S-Notoginsenoside R2质量规格：HPLC≥90%，标准品

CM-M030小鼠肠粘膜上皮细胞完全培养基100mL无水醋酸锌Zinc acetate质量规格：AR

HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞5-氟吲哚-2-羧酸5-Fluoroindole-2-carboxylic acid质量规格：>98%,原装进口

EB病毒转化的人B细胞;KMY0911 人皮下脂肪细胞完全培养基 100mL3-环戊基-L-丙氨酸3-Cyclopentane-L-alanine质量规格：>98%,BR

角膜上皮细胞培养基CEpiCMSEA-0400SEA0400质量规格：>98%,钠离子-钙离子交换子（NCX）抑制剂
幼蚊细胞;C6/364-丁氧基邻苯二甲腈(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)4-Butoxyphthalonitrile

SELE Others Human 人 E-Selectin / CD62E 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,3-二亚氨基异吲哚啉(>98.0%(T))质量规格：>98.0%(T)1,3-Diiminoisoindoline

人羊膜细胞;WISH4,5-二氯邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))质量规格：>98.0%(GC)(N)4,5-Dichlorophthalonitrile

CD3D Others Mouse 小鼠 CD3d / CD3 delta 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-十二烷氧基邻苯二甲腈(>99.0%(GC))质量规格：>99.0%(GC)4-Dodecyloxyphthalonitrile

人尿道上皮细胞完全培养基 100mL4-叔丁基杯[4]芳烃(>98.0%(HPLC))质量规格：>98.0%(HPLC)4-tert-Butylcalix[4]arene
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。