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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3807 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
睡眠嗜组织菌PCR检测试剂盒供应 | Histophilus somniPCR | BKP3807 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
EAC(小鼠艾氏腹水癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0238U-87 MG(人神经细胞)5×106cells/瓶×2 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 Cdna-TGF-β1 Dinding Protein cDNA6-KT激动素1克USP级,95%
TNFa转染耐VP16绒癌细胞;JEG-3-VP16-TNFa2-基-1H-咪坐 2-Mqthylimidczolq 693-98-1
FIGF Others Rat 大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-metxoxybenzoicacid间甲氧基本酸25克超,99%
脂肪间质干细胞 Adult adipose derived mesenchymal stem cells碳酸shēng huà shì jì容量:100克
SW038-C2细胞,人脑胶质母细胞瘤细胞 致病性大肠埃希氏菌 人间充质干细胞-脂肪RNAHMSC-ad miRNA5 μgPlateCountAgar 100g原装/500g原装 BD 247930
大鼠肺泡巨噬细胞;NR8383[AgC11x3A; NR8383.1]三氧化二铬(>99%,BR)Chromium (III) oxide质量规格:>99%,BR
PLC/PRF/5细胞,人亚历山大细胞系 小鼠胚成纤维包装细胞,PA317细胞 CL-0018A9(小鼠皮下结缔组织细胞)5×106cells/瓶×2四氧化三钴(>99%,BR)Cobalt (II, III ) oxide质量规格:>99%,BR
SPC-A-1(人细胞) 5×106cells/瓶×2乙酸钴四水(>99.5%,BR)Cobaltous acetate, tetrahydrate质量规格:>99.5%,BR
HDMEC-c adult 人真皮微内皮细胞(HDMEC)来自成年捐献者 500,000cells 肝窦内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)钴粉(>99%,BR)Cobaltous powder质量规格:>99%,BR
小梁网细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)铜粉(>99.5%,BR)Copper powder质量规格:>99.5%,BR
睡眠嗜组织菌PCR检测试剂盒供应小鼠胚胎成纤维细胞;C3H 10T1/2 2A62-[2-(2-t-Boc-氨基乙氧基)乙氧基]乙醇2-[2-(2-t-Boc-aminoethoxy)ethoxy]ethanol 质量规格:美国进口原装
95-C细胞,人低转移细胞 大鼠肾小管上皮细胞,NRK细胞 CL-0154MDCK(犬肾细胞)5×106cells/瓶×22'-脱氧-2',2'-二氟尿嘧啶核苷2’,2’-Difluoro-2’-deoxyuridine 质量规格:美国进口原装,97%
TSCCa(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2BMS 582664Brivanib alaninate质量规格:>97%
HCF-c 人类的成纤维细胞(HCF) 500,000cells 神经元细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)龙胆二糖Gentiobiose质量规格:>96%,原装进口
脑内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)西洛多辛Silodosin质量规格:>98%
KLE(人细胞) 5×106cells/瓶×2纺锤菌素二盐酸shēng huà shì jì容量:100克
Promocell C-28010 Mesenchymal Stem CellGrowth Medium, 间充质干细胞生长培养基(即用型) 500ml偶氮二异丁晴(阴凉)(*) 2,2'-czobis(2-mqthylpropionitnilq)
人气管平滑肌细胞总RNAHTSMC NA琼脂糖蛋白Ashēng huà shì jì容量:RT1克
PGLYRP1 Others Mouse 小鼠 PGLYRP / TNFSF3L 人细胞裂解液 (阳性对照) 大孔吸附树脂D101shēng huà shì jì容量:5克
HT1080 人成细胞,3-二基联本胺盐酸盐3,3',4,4'-Bipxenyltetramine tetraxy7nochloride
特点优势:
1. 特异性:睡眠嗜组织菌PCR检测试剂盒供应使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。