PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：前病毒PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

FibroFectagen? 成纤维细胞转染试剂盒,CRYSTALLINE(环已亚胺)超级100MGCOLD

CD52 Others Rat 大鼠 CD52 / CDW52 人细胞裂解液 (阳性对照) 邻安基本加醋(易制读-1) cnthrcnilic ccid 118-9-3

人视网膜色素上皮细胞完全培养基 100mLNystatin制真菌素250毫克BR，鱼鳞提取

TMNE细胞，化学转化小鼠鼻咽上皮细胞 C6(脑细胞) 牛肾细胞;MDBKL-焦谷酸25克

EFNB1 Protein Human 重组人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His & Fc 标签)(NAA)
Z-HL16C细胞，人胚突变癌细胞 非洲绿猴肾细胞,COS-6细胞 CL-0074DLD-1(人腺癌细胞)5×106cells/瓶×2去乙酰地尔硫卓Desacetyl Diltiazem质量规格：美国进口

SW620(人细胞) 5×106cells/瓶×2去[5-(2-二甲氨基)乙基]地尔硫卓Des[5-(2-dimethylamino)ethyl] Diltiazem质量规格：美国进口

HPAEC-c 人肺动脉内皮细胞(HPAEC) 500,000cells 颅盖造骨细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)N,N-去二甲基地尔硫卓盐酸盐N,N-Didesmethyl Diltiazem Hydrochloride质量规格：美国进口

肾实质细胞Many types of cells包装：5 ×105方(1ml)O-去乙酰-N-去甲基地尔硫卓O-Desacetyl-N-desmethyl Diltiazem质量规格：美国进口

SEMA4A Others Human 人 SEMA4A / Semaphorin-4A 人细胞裂解液 (阳性对照) N-去甲基地尔硫卓盐酸盐N-Desmethyl Diltiazem Hydrochloride质量规格：美国进口
前病毒PCR检测试剂盒说明书THP1细胞，人单核细胞型瘤 人导管瘤细胞,BT-474细胞 非必需氨基酸　100XNEAA4-叔丁基二苯硫(>98.0%(GC))4-tert-Butyldiphenyl Sulfide质量规格：>98.0%(GC)

非洲绿猴肾细胞;VERO双(4-羟苯基)硫(>98.0%(GC))Bis(4-hydroxyphenyl) Sulfide质量规格：>98.0%(GC)

IL18BP Others Human 人 IL18BPa 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-(二乙基氨基)苯二苯腙(>98.0%(HPLC)(N))4-(Diethylamino)benzaldehyde Diphenylhydrazone质量规格：>98.0%(HPLC)(N)

猴肾细胞;vero IgRCD4-1,1'-二萘胺(>98.0%(HPLC)(N))1,1'-Dinaphthylamine质量规格：>98.0%(HPLC)(N)

IFNAR1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2'-二萘胺(>98.0%(GC))2,2'-Dinaphthylamine质量规格：>98.0%(GC)
F9 小鼠γ-球蛋白(牛)shēng huà shì jì容量：100克

SIGIRR Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-(二环己基膦基)-1-本基吲哚 95% (NMR) 2-(Dicyclohqxylphosphino)-1-phqnylindolq 740812-36-2

人脐内皮细胞;HUV-EC铝片shēng huà shì jì容量：RT500克

PSG6 Others Human 人 PSG6 / PSG10 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) Na-本甲酰-L-精酰胺盐酸盐shēng huà shì jì容量：25毫克

CL-0302PA319(人细胞)5×106cells/瓶×27579-20-63-基-4-羧酸3-Aminoisonicotinic acid
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。