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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3826 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
66人病毒6型PCR检测试剂盒说明书 | Human Herpesvirus6A(HHV6A)6APCR | BKP3826 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
狗肺成纤维样细胞;DogL1Dimetxylyellow甲基黄25克电泳级,90%
人成纤维细胞(HPrF)(5×105)1,3-二录本;间二录本 1,3-Dichlorobqnzqnq 241-73-1
CL-0123IBRS-2(猪肾细胞)5×106cells/瓶×2工;水银 Mqrcury;Quick silvqr
人肾上腺皮质腺癌细胞;NCI-H295R 大鼠虹膜色素上皮细胞完全培养基 100mLZ-甘酰-L-脯酰-L-精酰对硝基盐,英文名或英文缩写:Z-Gly-Pro-Arg PNA acetate salt,级别:BR,98%,规格:5克
BEL/FU 人尿嘧啶耐药株肝素钠标准品(冷冻运输)NA
Tsu-Pr1细胞,非型 人子宫内膜腺癌细胞,KLE细胞 微内皮细胞cDNAHCMEC cDNA依匹斯汀Epinastine质量规格:美国进口
非洲绿猴肾细胞;VERO9,13b-脱氢依匹斯汀盐酸盐9,13b-Dehydro Epinastine Hydrochloride质量规格:美国进口
CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人细胞裂解液 (阳性对照) 7-氯依匹斯汀盐酸盐7-Chloro Epinastine Hydrochloride质量规格:美国进口
正常大鼠肾细胞;NRK9-氧络依匹斯汀盐酸盐9-Oxo Epinastine Hydrochloride质量规格:美国进口
LAYN Others Rat 大鼠 Layilin / LAYN 人细胞裂解液 (阳性对照) 6β-羟基依普利酮6β-Hydroxy Eplerenone质量规格:美国进口
66人病毒6型PCR检测试剂盒说明书Hep3B2.1-7细胞,人细胞 人髓母细胞瘤细胞,D341Med细胞 中国仓鼠卵巢细胞;CTLA4 Ig-24吡嗪酰胺(标准品)Pyrazinamide质量规格:含量测定
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L](小鼠成纤维 5×106cells/瓶×2盐酸地美环素;去甲基金霉素Demeclocycline hydrochloride质量规格:>900μg/mg,BR
Promocell C-28014 Mesenchymal Stem CellChondrogenic Diff. Medium w/o, 间充质干细胞软骨分化培养基无诱导剂(即用型) 100ml盐酸地美环素;去甲基金霉素(标准品)Demeclocycline hydrochloride质量规格:效价测定,标准品
人海马趾神经元RNAHN-h miRNA5 μg甲基帕罗西汀N-Methyl Paroxetine质量规格:>99%
小鼠神经质细胞(MN-sn)(1×106)硫酸头孢喹诺Cefquinome sulfate质量规格:干品Cefquinome>80%,BR
CFPAC-1细胞,人细胞 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞,RD细胞 小鼠胚胎成纤维细胞;3T6-Swiss albinoβ-Alanine3-基酸10克BR,98%
Hs 578T(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2二甲基黄 Dimethyl yellow,98% 1960-11-7 10G 通用试剂
Cellgro 25-072-CV Lymphocyte Separation Medium(人细胞分离液) 500ml录化金(+4℃)(阴凉);四录金醋;录金水合物 Gold(III) chloridq hydrctq;xy7nogqn tqtrcchlorocurctq(III) hydrctq;Tqtrcchlorocuric(III) ccid 13423-07-1
人前脂肪细胞-内脏裂解物HPA-v LPROTEINMWMARKER,LOWRANGE蛋白Marker生物技术级暗蓝色透明液体FROZENsigma
CHEK2 Others Mouse 小鼠 CHK2 / CHEK2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 923-61-5二棕榈酰-L-a-1脂酰1,2-DIPALMITOYL-SN-GLYCERO-3-PHOSPHOETHANOLAMINE
特点优势:
1. 特异性:66人病毒6型PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。