【产品名称】: 人偏肺病毒PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Human Metapneumo Virus(hMPV )RTPCR
【货号】: BKP3834

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

人偏肺病毒PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

rRTEC, 大鼠肾小管上皮细胞录化亚锑，英文名或英文缩写：Antimony(III)chloride，级别：CP，规格：10克

ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 氧化钨铵 Ammonium metatungstate hydrate,≥99.0% 174501-64-5 25G 通用试剂

大鼠嗅鞘细胞完全培养基 100mL1醋 ≥99%(2-8℃) LIGNOCqRIC cCID 227-29-2

DH82狗肾恶性症细胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培养基(GIBCO)+10%FBS曙红Y(水溶)shēng huà shì jì容量：100克

IFNA5 Protein Human 重组人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 标签)9025-35-8α-半乳糖苷酶(+4℃)EC 3.2.1.22
TE671 subline No.2细胞，人横纹肌细胞 化脓性链球菌 转PYTL基因小鼠支持细胞;15P-1妥布霉素ATobramycin A质量规格：美国进口

CCL4 Protein Human 重组人 CCL4 / MIP1B 蛋白 (His 标签)生物素基妥布霉素酰胺Biotinyl Tobramycin Amide质量规格：美国进口

LS-174T(人腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 人 PRNP / Prion 人细胞裂解液 (阳性对照) 妥布霉素硫酸盐Tobramycin sulphate质量规格：美国进口

兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-1氘化妥布霉素Tobramycin Deuterated质量规格：美国进口

CHL1 Others Mouse 小鼠 CHL-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸拓扑替康标记 d6Topotecan Hydrochloride Labeled d6质量规格：美国进口
P3X63Ag8.653细胞，细胞 耐长春新碱细胞系,HCT-8/VCR细胞 CM-H028人内皮细胞完全培养基100mLN-Boc-N-去甲伊马替尼N-Boc-N-Desmethyl Imatinib质量规格：美国进口

正常大鼠肾细胞;NRK伊立替康标记物d10Irinotecan Labeled d10质量规格：美国进口

REG3A Others Mouse 小鼠 REG3A 人细胞裂解液 (阳性对照) 6-O-甲基-d3-鸟嘌呤6-O-Methyl-d3-guanine质量规格：美国进口

口腔角质细胞培养基OKMN7-(2-氨基甲酰-2-羟乙基)鸟嘌呤N7-(2-Carbamoyl-2-hydroxyethyl)guanine质量规格：美国进口

MAPK13 Others Human 人 p38 delta / MAPK13 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 2-氨基-6,8-二羟基嘌呤盐酸盐2-Amino-6,8-dihydroxypurine Hydrochloride质量规格：美国进口
人偏肺病毒PCR检测试剂盒说明书人侵袭性脉络膜色素瘤细胞;MuM-2B血清兔抗BSA10克RT

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 酰辅酶A 内盐 ≥93% (HPLC) (-20℃) ccqtyl coqnzymq c wo7ium sclt 1009-73-

MDA-MB-436 人腺癌细胞葡聚糖凝胶 Sephade... Sephadex G-50 Fine 9048-71-9 100G 分离试剂

NCI-H358人非小细胞细胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSwo7iumGluconate葡萄糖酸钠*白色至微黄色精细结晶RTsigma

KITLG Protein Human 重组人 SCF / C-kit ligand 蛋白 (aa 1-189, His 标签)(甘油)
PCR检测试剂盒

人偏肺病毒PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。