技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

特点优势：
1. 特异性：人病毒18PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。
TWSG1 Others Mouse 小鼠 TWSG1 人细胞裂解液 (阳性对照) MEGA-10MEGA-10超级5G85261-20-7COLD

大鼠脑膜细胞完全培养基 100mL2-安基-4-羧醋 2-cminoisonicotinic ccid 1336-8-

MCF 10A人正常上皮细胞 MCF 10A of normal human mammary epithelial cells MEGM Bullet Kit(Clonetics Corparation CC-3150)+100ng/ml choleratoxin(Sigma C8052)2XYTMEDIUMBROTH2XYT 培养基肉汤生物技术级100GRT

IFNA4 Protein Mouse 重组小鼠 IFNA4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 标签)苄青霉素钠1公斤

MPC-11(小鼠浆细胞瘤) 5×106cells/瓶×2 BALB/3T3(BALB/C小鼠胚成纤维细胞)2183-17-71-1酸钠盐ALPHA-NAPHTHYL PHOSPHATE DIwo7ium SALT
SW579(人甲状腺鳞癌细胞 ) 5×106cells/瓶×2辛弗林Synephrine质量规格：>98%,BR

HSaVEC-c 人隐内皮细胞(HSaVEC) 500,000cells 成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)辛弗林盐酸盐Synephrine HCl质量规格：HPLC≥98%，标准品

肾小管上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)三尖杉宁碱(标准品）Cephalomannine质量规格：HPLC≥98%，标准品

GHR Others Rat 大鼠 GHR / Growth Hormone Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 吉莫斯特;吉美嘧啶(标准品)Gimeracil质量规格：>99%,标准品

NRL1 化大家鼠肺成纤维样细胞吉莫斯特;吉美嘧啶Gimeracil质量规格：>98%,二氢嘧啶脱氢酶(DPD)抑制剂
人病毒18PCR检测试剂盒直销CXCL16 Protein Canine 重组狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 标签)2,7-二溴-9,9-二己基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-dihexylfluorene质量规格：>98.0%(HPLC)

MGC80-3(人细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FGFR2 / CD332 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,7-二溴-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC))2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene质量规格：>98.0%(HPLC)

黄牛皮肤细胞;BTA-S24,5-亚乙基二硫代-1,3-二硫醇-2-硫酮(>98.0%(GC))4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiole-2-thione质量规格：>98.0%(GC)

IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,5-乙撑二硫代-1,3-二硫酚-2-酮(>98.0%(GC))4,5-Ethylenedithio-1,3-dithiol-2-one质量规格：>98.0%(GC)

肾小球内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)4,5-甲二硫基-1,3-二硫醇-2-酮(>95.0%(HPLC))4,5-Methylenedithio-1,3-dithiol-2-one质量规格：>95.0%(HPLC)
HCT-8(人盲肠腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0402NCI-H520(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴肾细胞;MMK3录化1公斤

人导管瘤细胞;BT-474姆沙伯W/AW-DMCS CHROMOSORB W/cW-DMCS

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin / PDPN 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 邻苯 o-Phenylenediamine (≥98%, OPD)  10G 通用试剂

CM-R022大鼠甲状腺上皮细胞完全培养基100mL录化三本四氮唑沙保罗培养基25毫升2～8℃

Raw264.7, 小鼠单核巨噬细胞细胞 牛肾细胞,MDBK细胞 Hs 578Bst(人成纤维细胞)(D-基半乳糖)