【产品名称】:人副病毒1型PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Human Parainfluenza Virus 1(HPIV1)1RTPCR
【货号】: BKP3846

【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

人副病毒1型PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

滑膜细胞培养基SMIEFCATHODEBUFFER,20XIEF阴极缓冲液, 20X蛋白组学级透明淡黄色液体RTsigma

PRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人细胞裂解液 (阳性对照) 1，3-本二流醇 1,3-BqNZqNqDITHIOL 66-04-0

人细胞;1301三拂醋工 Mqrcuric trifluoroccqtctq 1327-21-7

大鼠胰岛细胞瘤细胞;INS-1 神经上皮瘤细胞，SK-N-MC细胞 MPC细胞，小鼠垂体细胞4-甲基伞形酮-β-D-葡萄糖苷，英文名或英文缩写：MUD，级别：BR，规格：100克

HT-29, 人细胞 Human617-45-8DL-天冬酸;DL-天冬酸;DL-天门冬酸;DL-基丁二酸;DL-基琥珀酸DL-Aspartic acid
SMMC-7721人细胞 SMMC-7721 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS吲哚美辛Indometacin质量规格：>99%,AR,BP2010

RSPO1 Protein Mouse 重组小鼠 R-Spondin 1 / RSPO1 蛋白 (His 标签)吲哚美辛（标准品）Indometacin质量规格：HPLC>98%,标准品

人平滑肌细胞 (HBSMC)( 5×105 ) MA, 小鼠星形胶质细胞 Mouse西米替汀Cimetidine质量规格：>99%,USP32,A型

中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-163西米替汀（标准品）Cimetidine质量规格：HPLC>98%,标准品

RAB27B Others Human 人 RAB27B 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿德福韦/阿德福韦酯Adefovir dipivoxil质量规格：>99%,可用于细胞培养
CM-H091人大隐内皮细胞完全培养基100mL醋酸高(>95%,BC)Lead (IV) acetate质量规格：>95%,BC

GH3, 大鼠垂体生长激素腺瘤粉(>99%,BC)Lead powder质量规格：>99%,BC

人癌细胞;MDA-MB-435S 人视网膜微内皮细胞完全培养基 100mL碱式碳酸(>99%,BR)Lead(II) carbonate basic质量规格：>99%,BR

人平滑肌细胞总RNAHCSMC NA雷氏曼着色剂Leishman's stain质量规格：BS

PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人细胞裂解液 (阳性对照) 来普霉素B 1%溶液Leptomycin B 1% soluton质量规格：>95%(HPLC),BC
人副病毒1型PCR检测试剂盒说明书大鼠脑细胞;C6SDS(wo7iumDODECYLSULFATE),10%SOLUTIONSDS溶液超级透明无色液体RTsigma

杂交瘤(B类);Z1510C6D10F4G6 小鼠脉络膜细胞完全培养基 100mL二异脲酸钠  dichloroisocyanurate,96% 2893-78-9 100G 通用试剂

HAVSMC, 人主动脉平滑肌细胞 Humanα-1,6 葡聚糖 GLYCOGqN 9002-79-

EFNA1 Others Mouse 小鼠 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 粘液素II，英文名或英文缩写：Mucin，级别：BR，200u/mg，规格：1公斤

人红系细胞;TF-1姆沙伯 W NAWChromosorb W-NAW
PCR检测试剂盒

人副病毒1型PCR检测试剂盒说明书 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。