PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：人类嗜淋巴细胞病毒1型PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

A-431(人表皮癌细胞) 5×106cells/瓶×2十二烷基本磺酸钠-6，英文名或英文缩写：wo7ium dodecylbenzenesulfonate，级别：FMP，规格：1克

RK2 Others Human 人 RK2 / k-B / KB 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-脱氧-D-葡萄糖-5-鳞醋酯内盐 ≥99.0% (TLC)(-20°C) (2,3-dixy7noxy-4-oxo-pqntoxy)phosphonic ccid 190079-18-6

恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4]红色氧化;四氧化三;丹;红丹;氧化 Lqcd(II,IV)oxidq;MiniuM 1314-41-6

AFM Others Human 人 AFM / Afamin 人细胞裂解液 (阳性对照) AEBSFAEBSF蛋白组学级50MG30827-99-7COLD

小肠平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)6284-40-8葡MegluMine (AS)
RTN4R Others Human 人 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酰辅酶A三锂盐Acetyl coenzyme A trilithium salt质量规格：95%,美国进口原装

人胰腺上皮细胞完全培养基 100mL尿素酶,脲酶(巨豆)Urease质量规格：>45 U/mg,进分

HT1080细胞，人成纤维细胞 热带念珠菌 tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-1A3蛋白酶VIIIProtease type VIII质量规格：美国原装进口7-15 units/mg,来源于地衣芽孢杆菌

CCL3 Protein Rat 重组大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白曲安奈德Triamcinolone Acetonide质量规格：>98%,BR

MDBK(牛肾细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 EphB2 / Hek5 人细胞裂解液 (阳性对照) 曲安奈德(标准品)Triamcinolone Acetonide质量规格：>98%,标准品
人类嗜淋巴细胞病毒1型PCR检测试剂盒价格PRL Others Mouse 小鼠 PRL / Prolactin 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 草酸依地普仑/草酸艾司西酞普兰（标准品）Escitalopram Oxalate质量规格：HPLC>98%,标准品

大鼠嗜碱性粒细胞性细胞;RBL-1消旋卡多曲Racecadotril质量规格：>99.5%，EP6.2

BEL-7402细胞，细胞 人口腔表皮样癌细胞,KB细胞 小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-A2消旋卡多曲（标准品）Racecadotril质量规格：HPLC>98%,标准品

C57BL/6小鼠T细胞瘤细胞;RMA乙酰螺旋霉素Acetylspiramycin质量规格：>1200u/mg,CP2005

CD226 Others Human 人 CD226 / DNAM-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 尼罗替尼Nilotinib质量规格：>98.5%,BR
成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)荧光素酶(细菌)，英文名或英文缩写：Luciferase from Bacteria，级别：精制级，40u/mg，规格：5克

T/G细胞，人平滑肌细胞 KM小鼠网织细胞瘤株,LⅡ细胞 人真皮成纤维细胞-胎儿裂解物HDF-f L三钠盐三(3-磺酰苯... TPPTS,≥95.0% 63995-70-0 250MG 通用试剂

NEC(人细胞) 5×106cells/瓶×2拂橡胶 III Fluoro gum III

Caki-1(人肾透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0046C4-2(人细胞)5×106cells/瓶×2 小鼠单核巨噬细胞;J774A.1ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS碱性嶙酸酶(含酶及稀释液)生物技术级1000 UnitsCOLD

绵羊皮肤细胞;OAR-S1硅烷偶联剂SILANE COUPLING AGENT
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。