PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：人多瘤病毒9PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

色素细胞生长生长添加物MelGSPCRMARKERWITHLOADINGDYEPCR Marker, 含上样缓冲液生物技术级500 lFrozen

RSPO1 Others Human 人 RSPO1 / R-Spondin-1 (aa 1-146) 人细胞裂解液 (阳性对照) (1R)-(+)- (1R)-(+)-cLPHc-PINqNq 7782-70-8

CSSTH1 中华鳖心肌来源细胞典化 Lqcd(II) iodidq 10101-63-0

T-107B中性蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL1,2,4,5-本四甲羧酸二酐，英文名或英文缩写：PMDA，级别：BR，99%，规格：25克

RGC-5, 小鼠视网膜神经节细胞24589-78-4N-甲基-N-(基硅烷基)三扶乙酰胺N-metxyl-N-(trimetxylsilyl)trifluonoeetemi7e
Ski细胞，人宫颈上皮细胞癌 人急性细胞T细胞,CCRF-CEM细胞 大鼠小肠隐窝上皮细胞;IEC-6乙酸二丙基铵(约0.5mol/L的水溶液)[离子对色谱级]IPC-DPAA (ca.  0.5mol/L in Water)质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂

BNL CL.2(小鼠胚胎肝细胞) 5×106cells/瓶×2乙酸二戊基铵(约0.5mol/L水溶液)[离子对色谱级]IPC-DAAA (ca.  0.5mol/L in Water)质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂

CPB1 Others Human 人 CPB1 / PCPB 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酸二己基铵(约0.5mol/L的水溶液)[离子对色谱级]IPC-DHAA (ca.  0.5mol/L in Water)质量规格：用于液相色谱-质谱的离子对试剂

中国仓鼠肺细胞;V791-辛烷磺酸钠[离子对色谱级]IPC-ALKS-8质量规格：离子对色谱用试剂

CALU Others Human 人 CALU / Calumenin 人细胞裂解液 (阳性对照) 1-壬烷磺酸钠[离子对色谱级]IPC-ALKS-9质量规格：离子对色谱用试剂
人多瘤病毒9PCR检测试剂盒直销CL-0206SGC7901(人细胞)5×106cells/瓶×2草酸铵(98~101%,BR)Ammonium oxalate hydrate质量规格：98~101%,BR

MLF, 小鼠成纤维细胞5'-单1酸腺苷(>95%，BR)Adenosine-5'-monophosphate, free acid质量规格：>95%，BR

Sars结构蛋白表达株;293sars181A 人膀胱上皮细胞完全培养基 100mL硫酸铝十六水(>98%,BR)Aluminum sulfate, hexadecahydrate质量规格：>98%,BR

人急性早幼粒细胞;HL-60葡萄糖-6-1酸脱氢酶，硫酸铵悬浮液Glucose-6-phosphate dehydrogenase质量规格：酶活>200 NADP units/mg，BC

PPP3R1 Others Human 人 PPP3R1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 苹果酸脱氢酶(>12,000U/ml，BC)Malate dehydrogenase质量规格：>12,000U/ml，BC
SUP-B15人Ph+急淋细胞系 SUP-B15 acute lymphoblastic leukemia cell line Ph+ IMDM培养基(GIBCO)+20%FBS二苯基砜-4,4'-二氯-3,3'-二磺酸二钠(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)Di Diphenylsulfone-4,4'-dichloro-3,3'-disulfonate

成纤维细胞生长因子双酚 C(>98.0%(GC))质量规格：>98.0%(GC)2,2-Bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)propane

293FT(人胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 成纤维细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)4,4'-异亚丙基二苯氧基乙酸(>98.0%(HPLC)(T))质量规格：>98.0%(HPLC)(T)4,4'-Isopropylidenediphenoxyacetic Acid

人成纤维细胞cDNAHCF cDNA四溴双酚A(>98.0%(GC)(T))质量规格：>98.0%(GC)(T)Tetrabromobisphenol A

IL1RL1 Others Human 人 IL1RL1 / ST2 ( isoform A ) 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-乙酰氨基-2-脱氧-D-半乳糖醛酸质量规格：美国进口2-Acetamido-2-deoxy-D-galacturonic Acid
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。