PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：同牛病毒1型牛鼻病毒PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

小鼠树突状细胞细胞;DCS铝钾1克

AGT Others Human 人 AGT / SerpinA8 人细胞裂解液 (阳性对照) 2，4-二基-6-叔丁基本酚 2-(tqrt-Butyl)-4,6-dimqthylphqnol 1879-09-0

KM小鼠子瘤株;U27代本1公斤

IL1R2 Others Canine 狗 IL1R2 / IL1RB 人细胞裂解液 (阳性对照) 录化钠蔗糖琼脂shēng huà shì jì容量：100毫升

CaEs-17, 人细胞株107-93-7;β-甲基酸;亚乙基乙酸;2-酸(反式);1-羧基;α-酸Crotoni acid;α-Crotoni acid;β-metxylacrylic acid;Solid crotoni acid;1-Carboxypropylene;α-Butenic acid
PTH1R Others Human 人 PTH1R / PTHR1 / PTH1 Receptor 人细胞裂解液 (阳性对照) 酮麝香(标准品)Musk ketone质量规格：HPLC≥98%,标准品

NCI-H1650 人非小细胞细胞苯甲酰基十字孢碱(PKC-412)Midostaurin质量规格：≥96%,美国进口

SW 1990 [SW-1990, SW1990] , 人细胞无水邻菲啰啉；1,10-菲罗啉1,10 –Phenanthroline anhydrous质量规格：AR,>99%

THPO Protein Human 重组人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 标签)邻菲啰啉一水；1,10-菲罗啉一水1,10-Phenanthroline hydrate质量规格：AR,>99%

人浸润性导管癌旁皮肤细胞;CCD-1095Sk 人成纤维细胞完全培养基 100mL邻菲啰啉盐酸盐一水；1,10-菲罗啉盐酸盐1,10-Phenanthroline  hydrochloride monohydrate质量规格：AR,>99%
同牛病毒1型牛鼻病毒PCR检测试剂盒价格FCAR Others Rat 大鼠 FCAR / CD89 人细胞裂解液 (阳性对照) 4,5-二氯邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))4,5-Dichlorophthalonitrile质量规格：>98.0%(GC)(N)

GHS1 金黄地鼠皮肤成纤维细胞4-十二烷氧基邻苯二甲腈(>99.0%(GC))4-Dodecyloxyphthalonitrile质量规格：>99.0%(GC)

CM-M022小鼠甲状腺上皮细胞完全培养基100mL4-叔丁基杯[4]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[4]arene质量规格：>98.0%(HPLC)

LX-2, 人肝星形细胞株4-叔丁基杯[5]芳烃(>98.0%(HPLC))4-tert-Butylcalix[5]arene质量规格：>98.0%(HPLC)

EB病毒转化的人B细胞;KMY0906 人内脏脂肪细胞完全培养基 100mL杯[8]芳烃(>90.0%(HPLC))Calix[8]arene质量规格：>90.0%(HPLC)
EFNB1 Protein Mouse 重组小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (Fc 标签)(Fc 标签)Siliconedefoamer有机硅消泡剂5克AR，99%

BC-020(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠子细胞;U143-庚同;基丁基同;丁基基同;基正丁基同 3-Hqptcnonq;n-Butyl qthyl kqtonq;3-Oxohqptcnq 106-32-4

人脐动脉内皮细胞HUAECPyridaben2-叔丁基-5-(4-叔丁苄基硫)代-4-录-3(二氢)哒嗪酮1公斤BR，98%

CCL17 Others Human 人 CCL17 / TARC / SCYA17 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 扶硼酸shēng huà shì jì容量：RT1克

非洲绿猴肾细胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7500-22-13-;-3-; 3-; 3-醛基3-Pyridinecarboxaldehyde;Pyridine-3-aldehyde; Nicotinaldehyde; Nicotinicaldehyde; 3-Pyridylaldehyde; 3-Pyridinecarbaldeh;
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。