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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3877 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
同禽病毒1型鸡喉病毒PCR检测试剂盒直销 | Infectious Laryngotracheitis Virus(ILTV,1)PCR | BKP3877 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
SV40转化的非洲绿猴肾细胞;COS-7Streptozotocin链脲菌佐素超级1G18883-66-4
NCF2 Others Human 人 NCF-2 / NCF2 / P67phox 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 生物速 Biotin 28-82-2
小气道上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)L-SERINEL-丝酸美国药典级500G56-45-1RT
猕猴皮肤细胞;MMS4 人软组织细胞,TE 115.T细胞 Eca-109(细胞)L-甘-甘-异白三肽100克RT,避光
人小细胞细胞;NCI-H209Peptonepeef 500g 国产
PG-LH7细胞,人肺巨细胞癌(PG)的低转移亚系 小鼠胚成纤维包装细胞,ψ2细胞 CL-0026ARPE-19(人视网膜上皮细胞)5×106cells/瓶×2四溴双酚A双(2-羟乙基)(>93.0%(GC))Tetrabromobisphenol A Bis(2-hydroxyethyl) Ether质量规格:>93.0%(GC)
ST(猪细胞) 5×106cells/瓶×24,4'-(六氟异亚丙基)二酞1(>98.0%(GC)(T))4,4'-(Hexafluoroisopropylidene)diphthalic Anhydride质量规格:>98.0%(GC)(T)
HDMEC-c pre-screened 人真皮微内皮细胞(HDMEC)预选型 500,000cells 肝实质细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)3,3',4,4'-二苯酮四羧酸二酐(>96.0%(T))3,3',4,4'-Benzophenonetetracarboxylic Dianhydride质量规格:>96.0%(T)
胃粘膜上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)三环[6.4.0.02,7]十二烷-1,8:2,7-四羧酸二酐(>98.0%(GC))Tricyclo[6.4.0.02,7]dodecane-1,8:2,7-tetracarboxylic Dianhydride质量规格:>98.0%(GC)
SERPINA1A Others Mouse 小鼠 Alpha 1 Aiypsin / SerpinA1a 人细胞裂解液 (阳性对照) ε-己内酯(>99.0%(GC))ε-Caprolactone质量规格:>99.0%(GC)
同禽病毒1型鸡喉病毒PCR检测试剂盒直销marc-145-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)猴胚胎肾上皮细胞 Marc-145-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin1,4,5,8-萘四甲酰基二(>97.0%(N))1,4,5,8-Naphthalenetetracarboxdiimide质量规格:>97.0%(N)
PDGFC Protein Human 重组人 PDGF-C 蛋白 (Fc 标签)3,4,9,10-苝四甲酰二亚胺(>95.0%(N))3,4,9,10-Perylenetetracarboxylic Diimide质量规格:>95.0%(N)
人气管上皮细胞(HTEpiC)(5×105 ) MN-h, 小鼠海马神经元 Mouse9,10-二(1-萘基)蒽(>98.0%(HPLC))9,10-Di(1-naphthyl)anthracene质量规格:>98.0%(HPLC)
猫肾细胞;CRFK2,3,6,7,10,11-六(己氧基)苯并菲(>98.0%(HPLC))2,3,6,7,10,11-Hexakis(hexyloxy)triphenylene质量规格:>98.0%(HPLC)
CALR Others Human 人 CALR / Calreticulin 人细胞裂解液 (阳性对照) 二萘嵌苯(>98.0%(GC))Perylene质量规格:>98.0%(GC)
人脐动脉平滑肌细胞总RNAHUASMC NA低碳硫铁助溶剂shēng huà shì jì容量:RT,避光5克
MFAP5 Others Human 人 MFAP5 / MAGP2 人细胞裂解液 (阳性对照) 2,2,4-三基务烷;异忻烷 2,2,4-TriMqthylpqntcnq 240-84-1
人腹膜内皮细胞完全培养基 100mLshēng huà shì jì容量:RT25克
PA317细胞,逆转录病毒包装的NIH3T3细胞 A10(大鼠主动脉平滑肌细胞) 小鼠细胞;Sp2/0-Ag14苞肉培养基基础shēng huà shì jì容量:100毫升
CSF2 Protein Human 重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 (His 标签)1041-01-63,5-二-L-甲腺酸(-20°C)3,5-Diiodo-L-thyronine
特点优势:
1. 特异性:同禽病毒1型鸡喉病毒PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。