甲型病毒通用PCR检测试剂盒说明书【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

【产品名称】: 甲型病毒通用PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Influenza Virus ARTPCR
【货号】: BKP3902
组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

甲型病毒通用PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

T-112B胰凝乳蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL纤粘连蛋白shēng huà shì jì容量：RT1克

CADM3 Others Rat 大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-溴-2-典嘧啶 5-Bromo-2-iodopyrimidinq 183438-4-6

上皮细胞生长添加物EpiCGS维生素A棕榈酸酯shēng huà shì jì容量：10克

Hs 578T细胞，人成纤维细胞 人原胚肾转化细胞系,293 Ad5+细胞 胰岛β细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)戊二酸5克

雪羊皮肤细胞;SSHS1(番红O)
MuM-2B细胞，人眼脉络色素瘤细胞 光孢短柄帚霉 野生型人c-kit受体细胞株;A7d炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸Ethynyl Estradiol 3-β-D-Glucuronide质量规格：美国进口

趋化因子3-O-甲基 4-羟基雌二醇3-O-Methyl 4-Hydroxy Estradiol质量规格：美国进口

LLC-MK2(恒河猴肾细胞) 5×106cells/瓶×2 甲型 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 17α-雌二醇-16,16,17-d317α-Estradiol-16,16,17-d3质量规格：美国进口

小耳猪肺细胞;SEP-L2炔雌醇-2,4,16,16-d4Ethynyl Estradiol-2,4,16,16-d4质量规格：美国进口

人膀胱平滑肌细胞(HBdSMC)( 5×105 )炔雌醇3-硫酸盐Ethynyl Estradiol 3-Sulfate质量规格：美国进口
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1 细胞，P3X63Ag8.653细胞 RN-c细胞，大鼠皮层神经元细胞杀螟丹(标准品)Aramite质量规格：分析标准品,99%

人脐内皮细胞;HUV-EC杀螟丹标准溶液(100μg/ml,u=3%)Aramite solution质量规格：100μg/ml,u=3%

LIFR Others Mouse 小鼠 LIFR / CD118 人细胞裂解液 (阳性对照) Amberlite?IRA402 强碱型阴离子交换树脂(氯型)Amberlite? IRA402质量规格：氯型

脑动脉内皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)Amberlite XAD-1180N 非离子型多孔树脂(粒径0.350 - 0.600 mm)Amberlite® XAD1180N质量规格：粒径0.350 - 0.600 mm

CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 CTLA4 / CD152 人细胞裂解液 (阳性对照) 嘧菌酯（标准品）Azoxystrobin质量规格：分析标准品
甲型病毒通用PCR检测试剂盒说明书CD86 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD86 / B7-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 二十七烷shēng huà shì jì容量：保存：-20℃500毫克

兔晶体上皮细胞永生系;N/N1003A(RLE)无水录化(II) CHROMIUM(II) CHLORIDq 10049-02-2

QG-56细胞，人肺扁平上皮癌细胞 中国仓鼠仓鼠卵巢细胞亚株,CHO-K1细胞 CM-M010小鼠肺大动脉平滑肌细胞完全培养基100mL聚乙二醇 12000 Poly(ethylene glycol) 12,000 (PEG 12000) 25322-68-3 500G 通用试剂

Saos-2(人细胞) 5×106cells/瓶×2赤霉素GA4+7shēng huà shì jì容量：RT5克

Gibco 12558-011 TM-C100 Complete Medium,(system) 1 setDicamba 1g/5g Sigma 523844

PCR检测试剂盒

 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。