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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3916 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
克雷伯菌通用PCR检测试剂盒价格 | Klebsiella spp.PCR | BKP3916 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:克雷伯菌通用PCR检测试剂盒价格使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
T-102B胰蛋白酶-EDTA(含100mL酶解缓冲液)10mL正十九烷,英文名或英文缩写:Nonadecane,级别:AR,98%,规格:1克
CD83 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD83 人细胞裂解液 (阳性对照) 流化钡 BcriuM sulfidq;Sulfurctqd bcrytc
少突胶质前体细胞生长添加物OPCGS二氧嶙基钼酸水合物,英文名或英文缩写:Ammonium phosphomolybdate hydrate,级别:AR,99%,规格:25克
KLE细胞,人子宫内膜腺癌细胞 大鼠细胞,CRL-1548细胞 原代骨骼肌细胞培养特制添加剂Many types of cells包装:5/2.5/1ml氧化镓shēng huà shì jì容量:RT10克
HA(人羊膜细胞) 5×106cells/瓶×2(Horseradish)辣根过氧化物酶
LS 174T人腺癌细胞 LS 174T human colon adenocarcinoma cells DMEM培养基+10%FBS乌药内酯(标准品)Linderane质量规格:HPLC≥98%,标准品
TNFSF9 Protein Rat 重组大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 蛋白 (His 标签)D(十)-无水葡萄糖(标准品)D(+)-Glucose质量规格:HPLC≥98%,标准品
人卵巢上皮细胞(HOSEpiC) ( 5×105 ) Caco-2,人结直肠腺癌细胞 Human吴茱萸碱(标准品)Rutaecarpine质量规格:HPLC≥98%,标准品
细胞吴茱萸碱Rutaecarpine质量规格:>98%,BR
ALOX5AP Others Human 人 ALOX5AP / FLAP 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 吴茱萸碱(标准品)Evodiamine质量规格:HPLC≥98%,标准品
克雷伯菌通用PCR检测试剂盒价格人胃腺癌细胞;SGC-7901 [SGC7901] 大鼠脑动脉平滑肌细胞完全培养基 100mL羟基利托那韦Hydroxy Ritonavir质量规格:美国进口
MLTC-1 小鼠间质细胞瘤细胞去噻唑基甲氧基碳酰 利托那韦Desthiazolylmethyloxycarbonyl Ritonavir质量规格:美国进口
IL5RA Others Human 人 IL5Ra / CD125 人细胞裂解液 (阳性对照) 9'-去甲格拉司琼(格拉司琼杂质C)9'-Desmethyl Granisetron (Granisetron Impurity C)质量规格:美国进口
酶活性分析试剂盒CAT7-磺酰胺基-N-羟甲基氢氯噻嗪7-Sulfonamido-N-hydroxymethyl Hydrochlorothiazide质量规格:美国进口
EFNB2 Others Canine 狗 Ephrin-B2 / EFNB2 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-氯氢氯噻嗪5-Chloro Hydrochlorothiazide质量规格:美国进口
CM-R064大鼠上皮细胞完全培养基100mL2,2'-二氨基-4,4'-双噻唑(>98.0%(HPLC)(T))质量规格:>98.0%(HPLC)(T)2,2'-Diamino-4,4'-bithiazole
小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH3 小鼠肠动脉内皮细胞完全培养基 100mL1H-咪唑-4,5-二羧酸(>97.0%(HPLC)(T))质量规格:>97.0%(HPLC)(T)1H-Imidazole-4,5-dicarboxylic Acid
MN-h, 小鼠海马神经元 Mouse2,6-萘二羧酸(>98.0%(GC)(T))质量规格:>98.0%(GC)(T)2,6-Naphthalenedicarboxylic Acid
KIT Others Mouse 小鼠 c-kit / CD117 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,4-萘二羧酸(>95.0%(T))质量规格:>95.0%(T)1,4-Naphthalenedicarboxylic Acid
人细胞;MGC-8031,4-双(三甲基硅基)-1,3-丁二炔(>99.0%(GC))质量规格:>99.0%(GC)1,4-Bis(trimethylsilyl)-1,3-butadiyne