产酸克雷伯菌PCR检测试剂盒说明书【储存条件及有效期】:
-20℃避光保存，避免反复冻融，有效期6个月。
【适用仪器】:
ABI7300、ABI7500、LightCycler 480、iCycleriQ5、CFX96、SLAN等荧光定量PCR仪。
【样本采集、存放及运输】
u 样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
u 存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（最多冻融3次）；
u 运输：采用冰壶或泡沫箱加冰密封进行运输。
【自备试剂】:
核酸提取试剂，如QIAGEN QIAamp Viral RNA Mini试剂盒，也可选择其他合适的核酸提取产品。

【产品名称】: 产酸克雷伯菌PCR检测试剂盒说明书
【英文名称】: Klebsiella oxytocaPCR
【货号】: BKP3918
组成及试剂配制:

酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

产酸克雷伯菌PCR检测试剂盒说明书其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性，使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行，结合的特异性大大增加，被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区，其特异性程度就更高。
(2) 灵敏度高
PCR产物的生成量是以指数方式增加的，能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞；在病毒的检测中，PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位)；在细菌学中zui小检出率为3个细菌。
(3) 简便、快速
PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶，一次性地将反应液加好后，即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应，一般在2～4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析，不一定要用同位素，无放射性污染、易推广。
(4) 对标本的纯度要求低
不需要分离病毒或细菌及培养细胞，DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。

大鼠胰岛β细胞瘤细胞;RIN-m5F酸性橙II，英文名或英文缩写：Orange Ⅱ，级别：BR，99%，规格：25毫克

TEK Others Rat 大鼠 Tie2 / TEK 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-4-苄基-2-恶坐烷同 (R)-4-Bqnzyl-2-oxczolidinonq 1009-44-7

BGC-803 人细胞L-苏糖醋钙 L-Thrqonic ccid cclcium sclt 70723-61-6

97H-CMV-EGFP-puro(慢病毒构建稳定株)人细胞 97H-CMV-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) of human hepatocellular carcinoma cells DMEM+10% FBS+1%P/S+2ug/ml puromycinMALTEXTRACT麦牙提取物细菌学级1KGCOLD

TGFB1 Protein Human 重组人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白17469-89-5N,N-二甲基-L-本酸 99%N,N-DImetxYL-L-pxenYLALANINE
LNCaP clone FGC人细胞 LNCaP clone human prostate cancer cell FGC RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS烟酰胺/尼克酰胺/维生素B3Nicotinamide质量规格：>99%,BR

CTF1 Protein Human 重组人 Cardioophin-1 / CTF1 蛋白 (Fc 标签)维生素B3(标准品)Nicotinamide质量规格：HPLC≥99%,标准品

小鼠颗粒神经元(MGC)(1×106) 6-10B, 人细胞系 Human醋酸环丙孕酮,醋酸环丙氯地孕酮Cyproterone acetate质量规格：>98%,BR

叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21醋酸环丙孕酮(标准品)Cyproterone acetate质量规格：含量测定

EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲地孕酮Megestrol base质量规格：>98.5%,BR
人口腔表皮样癌细胞;KB 大鼠尿道上皮细胞完全培养基 100mL鬼臼(85%)Podophyllotoxin质量规格：>85%,BR

PC-12(低分化) 大鼠肾上腺嗜鉻细胞瘤细胞(低分化)β-淀粉样蛋白(25-35)β-Amyloid (25-35)质量规格：>95%,BR

DLL1 Others Mouse 小鼠 DLL1 / Delta-1 人细胞裂解液 (阳性对照) β-促激素，人β-MSH, human质量规格：>95%,BR

人恶性非霍奇金瘤患者的自然杀伤细胞;NK-92MI [NK92MI]β-促激素，猴β-MSH, monkey质量规格：>95%,BR

PDIA4 Others Human 人 ERP72 / PDIA4 人细胞裂解液 (阳性对照) Ac-垂体腺苷酸环化酶激活肽-38，人，小鼠，绵羊，猪，大鼠Ac-PACAP-38 (human, mouse,ovine, porcine, rat)质量规格：>95%,BR
产酸克雷伯菌PCR检测试剂盒说明书tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-4D6 胶原酶(含10mL酶解缓冲液) 1mLTRIS-ACETATE-SDSBUFFER,10XTris-醋酸-SDS电泳缓冲液超级无色无混浊液体RTsigma

HuH-7人细胞 Human溴水 BroMinq wctqr 776-92-6

CLU Others Mouse 小鼠 CLU / Clusterin 人细胞裂解液 (阳性对照) 橙 Acridine Orange base, 75% 494-38-2 1G 染色剂

人肾近曲小管上皮细胞RNAHRPTEpiC miRNA5 μg尿苷二嶙酸-α-葡糖醛酸，英文名或英文缩写：UDPGA，级别：BR，规格：200u

LTF Others Human 人 LTF / Lactoferrin / Lactoansferrin 人细胞裂解液 (阳性对照) (L-赖酸)

PCR检测试剂盒

 (一)总RNA提取
取液氮冻存脑组织置于玻璃匀浆器中，按100g:3ml的比例加入Trizol试剂，严格按照TrizolRNA提取试剂盒说明书的流程进行。
(1)加Trizol（按3ml/100mg组织，宁多勿少）置于玻璃匀浆器中匀浆后，冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中，4oC 13000g离心10min。
(3)上清液移至另一EP管中，室温放置10-15min。
(4)加入0.2ml氯仿/1mlTrizol，振荡15s，室温置5min。
(5)4oC 12000g离心15min。
(6)仔细吸取上层水相，移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml异丙醇/1mlTrizol，振摇，置室温10min。
(8)4oC 12000g离心10min，EP管底部可见白色沉淀物。
(9)弃上清，纸巾吸干，加入75%乙醇1ml，振摇，充分洗涤沉淀。
(10)4oC 11000g离心5min。
(11)吸尽乙醇，空气干燥10min（可离心加快干燥，尽量吸尽离心液体）。
(12)半透明时将RNA溶于去核酸酶的水20ul中（可吹打混匀），-20oC冻存备用。
(13)所提取的总RNA用核酸蛋白分析仪分析RNA含量和纯度，所有标本260/280nm吸光度的比值均为1.8-2.0。
(14)取所提取的总RNA用1%琼脂糖凝胶电泳，显示出清晰的28s和18s两条rRNA。
本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。