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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3894 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
甲型病毒72亚型PCR检测试剂盒说明书 | Influenza Virus AH7N2RTPCR | BKP3894 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
非洲绿猴肾细胞;GL-371,2-二羟基醌,英文名或英文缩写:Alizarin,级别:超,规格:1克
FLT1 Others Rat 大鼠 VEGFR1 / FLT-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 头孢哌同二水合物 Cqfopqrczonq Dihydrctq 6893-19-0
胎盘羊膜细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)dGTP,100mMSOLUTION,pH7.0 dGTP 100 mM溶液, pH 7.0生物技术级透明无色液体FROZENsigma
Jurkat D,E细胞,人T瘤转基因细胞 615小鼠株,Ca759细胞 多聚赖氨酸10 mg/mlPLL水解乳清蛋白25克
NCI-H295R(人肾上腺皮质腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2胆硫乳琼脂(D.H.L)DHL AGAR SAKAZAKI
NCI-N87 [N87]人细胞 细胞,Ec109细胞 MG-63(细胞)盐酸多奈哌齐-13C3Donepezil-13C3 Hydrochloride质量规格:美国进口
人细胞;NCI-H16505-O-去甲多奈哌齐5-O-Desmethyl Donepezil质量规格:美国进口
APOH Others Human 人 APOH / B2G1 人细胞裂解液 (阳性对照) 二氢多奈哌齐(非对映)Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers)质量规格:美国进口
鼬肺上皮细胞;MV-1-LuDehydrodeoxy多奈哌齐(多奈哌齐杂质)Dehydrodeoxy Donepezil (Donepezil Impurity)质量规格:美国进口
CD63 Others Rat 大鼠 CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人细胞裂解液 (阳性对照) 脱氧盐酸多奈哌齐Deoxy Donepezil Hydrochloride质量规格:美国进口
甲型病毒72亚型PCR检测试剂盒说明书MDA-MB-157细胞,癌细胞 人胎盘绒膜癌细胞,BeWo细胞 人肺动脉内皮细胞RNAHPASMC miRNA5 μg杆菌肽锌Bacitracin Zinc 质量规格:≥60U/mg,USP,BR,可用于细胞培养
恒河猴肾细胞;MMK2阿西美辛(标准品)Acemetacin质量规格:HPLC>98%,标准品
EPHB6 Others Human 人 EphB6 / EPHB6 人细胞裂解液 (阳性对照) 丙嗪Chlorpromazine HCl质量规格:>98%
人肺间充质干细胞总RNAHPMSC NA丙嗪(标准品)Chlorpromazine HCl质量规格:含量测定
小鼠海马趾神经细胞(MH-h)(1×106)地红霉素Dirithromycin质量规格:>95%,BR
CNE1, 人细胞系 草鱼吻端细胞,ZC-7901细胞 SW480 [SW-480](人细胞)丁酰shēng huà shì jì容量:25克
小鼠瘤细胞;P388D1(IL-1)三氧化;腊酐;氧化;醋;无水醋;酐;绿 ChroMic cnhydridq;ChroMic ccid;ChroMiuM(VI)oxidq;cncdonis grqqn;ChroMic oxidq;ChroMq grqqn;ChroMiuM sqsquioxidq 1333-8-0
EFNA1 Others Human 人 EFNA1 / Ephrin-A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 石蜡油 (USP级) Mineral oil (meets USP testing specifi... 8042-47-5 100ML 通用试剂
人癌细胞;MDA-MB-157俾氏麦棕Yshēng huà shì jì容量:保存:-20℃250毫克
PGA4 Others Human 人 PGA4 / Pepsinogen A 人细胞裂解液 (阳性对照) DMSO 100ml/500ml Amresco分装
特点优势:
1. 特异性:甲型病毒72亚型PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。