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产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3905 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
伊派病毒PCR检测试剂盒直销 | Ippy Virus(IPPYV)RTPCR | BKP3905 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
CL-0252A2(人腺样囊性癌细胞)5×106cells/瓶×2本扎录,英文名或英文缩写:HDBAC,级别:IND,规格:25克
人低分化;SK-LU-1 大鼠脑内皮细胞完全培养基 100mL雌摸司汀鳞醋内 (17-bqtc)-qstrc-1,3,5(10)-triqnq-3,17-diol 3-(bis(2-chloroqthyl)ccrbcmctq) 17-(dixy7nogqnphosphctq) diwo7ium sclt 202-73-9
MMQ 小鼠细胞申醋 LqcD(II) cRSqNcTq 3687-31-8
TIMP2 Others Human 人 TIMP2 / TIMP-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-甲基-1H-咪唑,英文名或英文缩写:4-metxylimidazole,级别:LR,规格:500克
色素细胞生长添加物(不含TPA)MelGS-22304-96-3N-苄氧羰基-L-天冬碱N-Benzyloxycarbonyl-L-asparagine
MMP8 Others Human 人 MMP8 / CLG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 乙酰胺(Standard for GC,≥99.5%(GC))Acetamide质量规格:Standard for GC,≥99.5%(GC)
中国仓鼠肺细胞;V79茴香醛(Standard for GC,≥99%(GC)) p-Anisaldehyde质量规格:Standard for GC,≥99%(GC)
EPHA1 Others Mouse 小鼠 EphA1 / EPH receptor A1 人细胞裂解液 (阳性对照) 癸二酸二辛酯(DOS)(Standard for GC, ≥98.5% (GC))Bis(2-ethylhexyl) sebacate质量规格:Standard for GC, ≥98.5% (GC)
A549 肺腺癌1,4-丁二醇(BDO)(standard for GC,≥99%(GC))1,4-Butanediol质量规格:standard for GC,≥99%(GC)
Li-7人细胞 Li-7 human hepatocarcinoma cells 1640+10%FBS1,2,4-丁三醇(BT)(standard for GC,≥99.5%(GC))(±)-1,2,4-Butanetriol质量规格:standard for GC,≥99.5%(GC)
伊派病毒PCR检测试剂盒直销CRT(人神经细胞) 5×106cells/瓶×2 肠内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)草酸亚锡(>98%,BR)Tin (II) oxalate质量规格:>98%,BR
人脊髓星形胶质细胞HA-sp二氧化锡(> 99%,BR)Tin (IV) oxide质量规格:> 99%,BR
IL2RA Others Cynomolgus 食蟹猴 IL2RA 人细胞裂解液 (阳性对照) 硫酸亚钛(>98%,BR)Titanium (III) sulfate质量规格:>98%,BR
犬肾细胞;MDCK(NBL-2)硫酸钛(>96%,BR)Titanium (IV) sulfate质量规格:>96%,BR
801-D细胞,人巨细胞性细胞 转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞,CHO-AA8细胞 CM-M026小鼠骨髓基质细胞完全培养基100mL柠檬酸三丁酯(>98%,BR)Tributyl 质量规格:>98%,BR
NCI-H1395人 Human lung adenocarcinoma cell line NCI-H1395 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS[Tyr9]- β-促激素 (猪)质量规格:>95%,BR[Tyr9]- β-MSH (porcine)
FAM3D Protein Human 重组人 FAM3D 蛋白 (His 标签)α-心钠素(1-28), human质量规格:>95%,BRα-ANF(1-28), human
293来源病毒包装细胞;ΦA 人上皮细胞完全培养基 100mLα-促激素质量规格:>95%,BRα-MSH
人髓核细胞总RNAHNPC NAβ-淀粉样蛋白(1-42),人质量规格:>95%,BRβ-Amyloid Peptide (1-42), human
REG1A Others Cynomolgus 食蟹猴 REG1A / PSPS 人细胞裂解液 (阳性对照) [Nle8’18,Tyr34]-甲状旁腺激素(7-34)酰胺 (牛)质量规格:>95%,BR[Nle8’18,Tyr34]-pTH (7-34) amide (bovine)
特点优势:
1. 特异性:伊派病毒PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。