上海帛科生物技术有限公司
   
     
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等孢球虫通用PCR检测试剂盒说明书
  • 品牌:帛科
  • 产地:进口、国产
  • 货号:BKP3906
  • 价格: ¥3800/盒
  • 发布日期: 2020-11-11
  • 更新日期: 2025-06-13
产品详请
产地 进口、国产
品牌 帛科
货号 BKP3906
用途 公司产品仅用物科研
包装规格 50次
纯度 %
CAS编号
是否进口

本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。

技术服务内容:

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。

产品名称

英文名称

货号

等孢球虫通用PCR检测试剂盒说明书

Isospora spp.PCR

BKP3906

PCR实验方法步骤:

方法
1
:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix
2mM             
4 μl     
引物110pM                 
2 μl     
引物210pM                 
2 μl     Taq
2U/μl               
1 μl     DNA
模板(50ng-1μg/μl  
1 μl     
ddH2O 50 μl  
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2
:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93 40s → 58 30s → 72 60s,循环30-35次,在72 7min
3
:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4待电泳检测或-20长期保存。
4
PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
引物扩增跨度: 200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.11umol10100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
BST2 Others Mouse 小鼠 TETHERIN / BST2 / CD317 人细胞裂解液 (阳性对照) 油醇,英文名或英文缩写:Terpineol,级别:AR99%,规格:500

小鼠卵巢成纤维细胞完全培养基 100mL三拂磺醋钡 BcRIUM TRIFLUOROMqTHcNqSULFONcTq 794-60-7

P9小鼠骨髓基质细胞 P9 mouse bone marrow somal cells 1640+10%FBS化四甲基,英文名或英文缩写:Tetrametxylammonium iodide,级别:AR98%,规格:1

白细胞介素-12超家族β-酸乙酯盐酸盐10RT

SW 1353(人细胞) 5×106cells/瓶×2 CBRH-7919(大鼠细胞)pxenmetxosulfate 1g /5g /10g/25g Amresco 0361
MLTC-1(
小鼠间质细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2西吡氯铵(标准品)Cetylpyridinium chloride质量规格:含量测定

Promocell C-23110 Fibroblast Growth Medium KIT,成纤维细胞生长培养基套装 500ml硫酸羟氯喹(标准品)Hydroxychloroquine sulfate质量规格:UV法溶出度检查

细胞车叶草苷(标准品)Asperuloside质量规格:HPLC98%,标准品

TSLP Others Mouse 小鼠 TSLP 人细胞裂解液 (阳性对照) Galeterone (TOK001)TOK-001质量规格:>98%,CYP17抑制剂

G422 神经山柰酚-3-槐二糖-7-鼠李糖苷Kaempferol 3-sophoroside-7-rhamnoside质量规格:HPLC85%,标准品
等孢球虫通用PCR检测试剂盒说明书ANGPTL4 Protein Mouse 重组小鼠 ANGPTL4 蛋白 (His 标签)1,5-二溴蒽(>97.0%(GC))1,5-Dibromoanthracene质量规格:>97.0%(GC)

Jurkat, Clone E6-1 (人急性T细胞细胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 1,8-二蒽(>98.0%(GC))1,8-Diiodoanthracene质量规格:>98.0%(GC)

猕猴肺细胞;MML29-酮基利培酮9-Keto Risperidone质量规格:美国进口

人气管平滑肌细胞 (HTSMC)( 5×105 )6-去氟-6-羟基利培酮6-Desfluoro-6-hydroxy Risperidone质量规格:美国进口

CL-0260BC-021(人癌细胞)5×106cells/瓶×27-羟基利培酮7-Hydroxy Risperidone质量规格:美国进口
SGC-7901
人细胞R-联萘酚1酸酯质量规格:>99%(R)-(-)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl hydrogenphosphate

CL-0410P3X63Ag8.653(小鼠细胞)5×106cells/瓶×22,6-二氯嘌呤质量规格:>97%,原装进口2,6-Dichloropurine

mCF, 小鼠成纤维细胞2,4-二氯喹唑啉质量规格:>98%2,4-Dichloroquinazoline

人胚肾上皮细胞系;KiMA 人直肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL9-氯甲基蒽质量规格:>98%,进口原装9-(Chloromethyl)anthracene

人纤维细胞;HT-10801-溴蒽(>97.0%(GC))质量规格:>97.0%(GC)1-Bromoanthracene

特点优势:
1. 特异性:等孢球虫通用PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%
 2.   
重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%
3.   
灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4.   
实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5.   
优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。


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