![]() |
产地 | 进口、国产 |
品牌 | 帛科 |
货号 | BKP3926 |
用途 | 公司产品仅用物科研 |
包装规格 | 50次 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 | 是 |
技术服务内容:
实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
乳酸杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书 | Lactococcus spp. PCR | BKP3926 |
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μ进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
特点优势:
1. 特异性:乳酸杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书使用的引物均经过详尽的生物信息学分析,经过GenBank及自建庞大数据库的比对,确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段,可实现对细菌种属及血清型的特异检测,特异性均达到100%。
2. 重现性:该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证,重现性为100%。
3. 灵敏性:该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测,当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时,可实现对其的直接检测,无需繁琐的增菌过程。
4. 实用性:检测范围广,涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌,可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测,整个检测过程为3-4个小时。
5. 优势1:序列资源丰富,除GenBank公布的序列外,公司还进行了大量菌株的序列破译,从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6. 优势2:该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证,凭借公司拥有的丰富的菌种资源,每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证,确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数*个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
人急性T细胞细胞;Jurkat, Clone E6-1 大鼠肝动脉内皮细胞完全培养基 100mL溴化亚铜shēng huà shì jì容量:100克
角质细胞生长添加物KGS番石榴二醛 Guajadial 959860-49-2 5MG 通用试剂
CA9 Others Canine 狗 Carbonic Anhydrase IX / CA9 人细胞裂解液 (阳性对照) L-派啶-2-羧醋 L(-)-Pipqcolinic ccid 3102-92-1
大鼠气管上皮细胞完全培养基 100mL间甲基红shēng huà shì jì容量:100克
CRFK细胞,猫肾细胞 SK-HEP-1(人细胞) 猕猴肺细胞;MML284-77-5邻本二二癸酯;本二二正癸酯;邻酞酸二正癸酯Didecyl phthalate;Di-n-decyl-o-phthalate;Convoil-20;DDP
KP-N-NS人肾上腺神经母细胞瘤细胞() KP-N-NS human adrenal neuroblastoma cells (brain metastasis) RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS重水,氧化氘(50G)Deuterium Oxide质量规格:D,99.9%
SF763细胞,人细胞 克雷伯菌 人颅骨造骨细胞总RNAHCO NA重水,氧化氘(100G)Deuterium Oxide质量规格:D,99.9%
RKO-AS45-1(人转基因细胞) 5×106cells/瓶×2氘代硫酸(0.55 ml x 10)Sulfuric Acid-D2质量规格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O
FRhK-4(恒河猴胚肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0307SW1116(人腺癌细胞)5×106cells/瓶×2 大耳山羊肾细胞;LDG-2氘代硫酸(50g )Sulfuric Acid-D2质量规格:D, 99%, acidity 96-98% IN D2O
主动脉平滑肌细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)氘代硫酸(100g )Sulfuric Acid-D2质量规格:D,99.5%, acidity 90% IN D2O
乳酸杆菌属通用PCR检测试剂盒说明书仓鼠肾细胞;HL-1地拉罗司,去铁斯若Deferasirox质量规格:>99.0%
小鼠树突状细胞低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);DG6-GFP 小鼠内脏脂肪细胞完全培养基 100mL地拉罗司(标准品)Deferasirox质量规格:HPLC>98%,标准品
HET-1A, 人食管上皮细胞 Human利培酮Risperidone质量规格:>98%,BR,可用于细胞培养
CD209B Others Mouse 小鼠 CD209B / DC-SIGNR1 人细胞裂解液 (阳性对照) 利培酮(标准品)Risperidone质量规格:HPLC>99%,标准品
人颅骨造骨细胞裂解物HCOL利托那韦(标准品)Ritonavir质量规格:HPLC>98%,标准品
人胚肺二倍体细胞;KMB-17 人甲状腺滤泡上皮细胞完全培养基 100mL聚酰胺shēng huà shì jì容量:10毫升
人卵巢腺癌细胞;SK-OV-32,4,5-三录本酚 2,4,5-Trichlorophqnol 92-92-4
APCS Others Human 人 Serum amyloid P compone / APCS / SAP 人细胞裂解液 (阳性对照) 微量可调移液器P10shēng huà shì jì容量:保存:-20℃1克
兔脂肪间质干细胞 Rabbit adipose derived mesenchymal stem cells虎红钠盐shēng huà shì jì容量:100克
BE(2)-M17细胞,人神经母细胞瘤细胞 寄生曲霉 293来源病毒包装细胞;ΦA117-78-22-羧基醌ANTHRAinoneONE-2-CARBOXYLIC ACID