PCR实验方法步骤：

方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μ进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。

技术服务内容：

实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳，以软件分析电泳条带的灰度值（IOD值），通过与内参基因的灰度值比较，判断目的mRNA的相对表达量。

特点优势：
1. 特异性：甲型病毒6亚型PCR检测试剂盒直销使用的引物均经过详尽的生物信息学分析，经过GenBank及自建庞大数据库的比对，确保所用的每一条引物均为种属或血清型特异的基因序列区段，可实现对细菌种属及血清型的特异检测，特异性均达到100%。
 2.   重现性：该系列所有产品均经过大量实验菌株的验证，重现性为100%。
3.   灵敏性：该系列产品可实现对检测菌的高灵敏检测，当样品中细菌的浓度达到103cfu/ml时，可实现对其的直接检测，无需繁琐的增菌过程。
4.   实用性：检测范围广，涵盖了对人体危害较为严重的17种及肠道致病菌，可实现对临床样品及其他环境取样的快速检测，整个检测过程为3-4个小时。
5.   优势1：序列资源丰富，除GenBank公布的序列外，公司还进行了大量菌株的序列破译，从理论上保证所选引物具有良好的保守性和特异性。6.   优势2：该系列试剂盒均经过大量的保守性及特异性实验验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一种检测试剂盒均经过了20余种标准菌株和临床菌株的保守性验证及40余种近缘标准菌株和临床菌株的特异性验证，确保在使用过程中不会出现任何的假阳性及假阴性报告结果。本产品只适用于科研，不能用于临床诊断。

间充质干细胞培养基MSCMREADYLADDER100BP,DNAMARKERDNA Markers生物技术级不透明，深紫色液体FROZENsigma

FCAR Others Rat 大鼠 FCAR / CD89 人细胞裂解液 (阳性对照) L-甘露糖 L-Mannose,99% 10030-80-5 250MG 通用试剂

GHS1 金黄地鼠皮肤成纤维细胞改良马丁琼脂培养基 FUNGI cGcR BcSq MODIFIqD KIMMIG

CM-M022小鼠甲状腺上皮细胞完全培养基100mL碱性嶙酸酯酶，英文名或英文缩写：CIAP，级别：BR，RZ>3,≥300u/mg，规格：5克

LX-2, 人肝星形细胞株7 300目(易)
NG108-15[108CC15]细胞，小鼠神经细胞瘤与大鼠神经之融合细胞 人细胞,Colo205细胞 高背鲫鱼尾鳍细胞;GBJd原儿茶醛,3,4-二羟基苯3,4-Dihydroxybenzaldehyde质量规格：≥98%

大鼠气管上皮细胞;RTE原儿茶醛(标准品)3,4-Dihydroxybenzaldehyde质量规格：HPLC≥98%，标准品

PDPN Others Mouse 小鼠 Podoplanin 人细胞裂解液 (阳性对照) 甲砜霉素甘氨酸酯盐酸盐Thiamphenicol glycinate HCl质量规格：>98%,BR

周边细胞培养基PM2.4-二羟基-6-甲基-烟酸乙酯Ethyl 2,4-dihydroxy-6-methylnicotinate质量规格：>98%

EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人细胞裂解液 (阳性对照) 恩拉霉素,持久杀菌素Enduracidin质量规格：BR,含量8%以上
甲型病毒6亚型PCR检测试剂盒直销HEp-2细胞，喉表皮样癌细胞 人食管鳞癌,KYSE70细胞 中国仓鼠卵巢细胞K1(亚系克隆);CHO-K1丹曲林钠半七水合物Dantrolene,  Salt Hemiheptahydrate质量规格：美国进口

tTA基因修饰的小鼠(B类);F9-CAG-tTA-1A33-甲氧基地氯雷他定3-Methoxy Desloratadine质量规格：美国进口

HA Others H1N1 甲型 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 异地氯雷他定Iso Desloratadine质量规格：美国进口

人晶体上皮细胞永生系;SRA01/04(HLE)N-甲基地氯雷他定N-Methyl Desloratadine质量规格：美国进口

人食道平滑肌细胞 (HESMC)( 5×105 )5-羟基地氯雷他定5-Hydroxy Desloratadine质量规格：美国进口
CCL16 Protein Human 重组人 CCL16 / HCC-4 / NCC4 蛋白 (His 标签)dGMP2′-脱氧鸟苷-5′-单嶙酸二钠盐25克BR，98%

LTEP-a-2(人) 5×106cells/瓶×2 人 CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-十一(烷)同 2-Undqccnonq 2011/1/9

犬肾细胞系/IgR;M/IgRCyanuricchloride2,4,6-三录-1,3,5-三嗪5克AR，98%

CCL1 Others Mouse 小鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 人细胞裂解液 (阳性对照) ALKPHOS2COMPONENTSYSTEMS碱性嶙酸酶(含酶及稀释液)生物技术级5000 UnitsCOLD

5637 人细胞313222-87-6PALLADIUM(II) nitnATE HYDRATE
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。